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目的:本课题从探讨脂肪组织炎症及脂代谢紊乱在2型糖尿病(T2DM)、胰岛素抵抗(IR)中的作用入手,应用苦酸通调法研究对自发性2型糖尿病大鼠(OLETF大鼠)脂肪组织炎症通路及脂代谢的影响,从分子水平论证其通过调控脂质代谢通路中AMPK活性,下调固醇调节元件结合蛋白(SREBPs)的表达,改善机体炎症及糖、脂代谢紊乱,进而干预T2DM、IR的发病机制。旨在阐释中医“苦酸通调法”治法学说的科学内涵,揭示“苦酸通调法”防治T2DM、IR的作用靶点,为肥胖的T2DM、IR的防治提供新的思路和方法。方法:本实验以自发T2DM大鼠(OLETF大鼠)为实验对象,将成模OLETF大鼠,随机分为模型组、二甲双胍组、苦酸通调方组,LETO大鼠为空白对照组,进行以下研究。1、观察糖、脂代谢指标的变化情况;2、采用ELISA检测OLETF大鼠血清中炎症因子TNF-α、IL-6、CRP水平变化;3、采用免疫组化和实时荧光定量PCR技术,从蛋白和基因水平观察各组脂肪组织中MCP-1、PAI-1表达的情况。4、采用HE染色法观察OLETF大鼠肝脏组织中脂质异位沉积的情况;采用GENMED试剂盒测定肝脏AMPK活性;采用免疫组化和实时荧光定量PCR技术从蛋白和基因水平对OLETF大鼠肝脏组织中SREBP-1c的表达情况进行观察。结果:1苦酸通调方对自发2型糖尿病大鼠糖、脂代谢的影响结果表明:治疗组大鼠体质量明显减轻,腹内脂肪含量明显减少,进而提示苦酸通调方具有较好的减肥疗效;治疗组可显著降低OLETF大鼠血糖、TG、TC以及FFA水平,提高稳态GIR,提示苦酸通调方具有良好的降糖、调脂及改善胰岛素抵抗的作用。2苦酸通调方对OLETF大鼠血清炎症因子TNF-α、IL-6、CRP的影响结果表明:模型组大鼠存在IR,血清中TNF-α、IL-6和CRP水平明显升高,治疗组TNF-α、IL-6和CRP水平明显降低,提示苦酸通调方能降低血清炎症因子的水平,从而改善胰岛素抵抗。3苦酸通调方对OLETF大鼠脂肪组织MCP-1、PAI-1表达的影响结果表明:模型组大鼠MCP-1、PAI-1表达量明显增加,治疗组大鼠MCP-1、PAI-1表达量明显降低,提示苦酸通调方具有较好的调脂及抗脂肪组织炎症的疗效。4苦酸通调方对OLETF大鼠肝脏组织AMPK活性、SREBP-1c表达的影响结果表明:模型组肝脏组织中脂肪异位沉积程度重,AMPK活性减低、SREBP-1c表达升高,治疗组肝脏组织中脂肪异位沉积程度减轻,AMPK活性上调、SREBP-1c表达降低。提示苦酸通调方可调节OLETF大鼠脂代谢水平,改善脂质异位沉积,其机制与调节肝脏AMPK酶活性,调节脂肪合成基因的重要转录调节因子有关。结论:目前,普遍认为胰岛素抵抗(IR)和β细胞分泌功能不全是2型糖尿病(T2DM)发病过程中的两个重要环节,其中IR被认为是引起T2DM的始发因素,并贯穿于T2DM的整个发生发展过程中。本课题结合中医古今文献及导师已有的临床实践,提出“六郁和络滞”、“毒损脂络”为肥胖T2DM、IR的中医病机关键;并在现代病理生理学机制基础上,提出脂代谢紊乱及脂肪组织炎症可能是引起IR,从而导致T2DM的一个重要原因的学术观点。并通过实验研究证实了“苦酸通调”中药能通过干预自发T2DM大鼠(OLETF)炎症因子及脂肪组织MCP-1、PAI-1的表达,调控脂质代谢通路中AMP激活性蛋白激酶(AMPK)活性,进而下调固醇调节元件结合蛋白(SREBPs)的表达,从而发挥改善机体炎症及糖、脂代谢紊乱,防治T2DM、IR的作用,为肥胖T2DM胰岛素抵抗的防治提供了新的思路和方法。