论文部分内容阅读
背景:食管癌是常见的恶性肿瘤之一,在全球范围内,食管癌的发病率位于恶性肿瘤的第7位,死亡率为第6位。我国食管癌占全球发病率的55.0%,位居全国恶性肿瘤发病率和死亡率的第6位,且约90%以上的食管癌以鳞状上皮细胞癌为主。其发生机制尚不明确,如何能找到食管癌发生、发展过程中的分子靶标,以便预警和及早发现食管癌,完成其早诊、早治,从而延长食管癌的生存,一直是肿瘤临床和科技工作者的重要研究内容。具核梭杆菌(具核梭菌Fusobacterium nucleatum.简称F.nucleatum),是一种革兰氏阴性(G-)专性无芽孢厌氧杆菌,广泛分布于人类及其他生物体内,存在于感染的牙髓牙周和其他炎症性病灶中,与厌氧菌临床感染关系密切。还可引起如心肌炎、化脓性关节炎、扁桃体炎、阑尾炎、肝溃疡以及脑、皮肤等多种感染性疾病。近年来研究发现,结直肠癌患者肿瘤组织中的F.nucleatum含量较正常组织显著增加,并促进结直肠癌的化疗耐药,可预测结直肠癌化疗后是否复发,判断预后。F.nucleatum在食管鳞癌的研究较少,有关F.nucleatum在食管鳞癌患者中唾液、粪便及癌组织的感染状况及其相关性尚未见报道。目的:探索F.nucleatum在食管鳞癌患者唾液、粪便及癌组织的感染状况,分析F.nucleatum与食管鳞癌临床病理特征的相关性及其与生存预后的关联。方法:收集2018年4月28日至2018年9月26日在河南科技大学第四附属医院(安阳市肿瘤医院)行手术治疗的食管鳞癌患者100例,获取口腔唾液、粪便及癌组织样本,分别抽提细菌DNA,Q-PCR法检测F.nucleatum在三种样本中的表达情况。以45例非癌人群的唾液、粪便及正常食管组织作为对照。采用单因素方差分析、卡方检验比较F.nucleatum在三种样本的表达差异,分析F.nucleatum与临床病理特征的关系;K-M法分析癌组织的F.nucleatum与生存预后的关系。结果:1.食管鳞癌患者唾液、粪便和鳞癌组织中F.nucleatum丰度比较:食管鳞癌组织中F.nucleatum丰度明显高于唾液及粪便中的F.nucleatum丰度(0.142±0.207 vs 0.040±0.066及0.0002±0.0010);食管鳞癌患者唾液中F.nucleatum丰度高于粪便(0.040±0.066 vs 0.0002±0.0010,P<0.01)。2.非癌人群唾液、粪便和食管正常组织中F.nucleatum丰度比较:正常食管组织及唾液中F.nucleatum丰度均高于粪便中的F.nucleatum丰度(0.031±0.024、0.028±0.030 vs 0.003±0.015,均P<0.05);正常食管组织与唾液之间F.nucleatum丰度相当(0.031±0.024 vs 0.028±0.030,P>0.05)。3.F.nucleatum在食管鳞癌患者和非癌人群的唾液、粪便和组织中表达比较:组织样本中F.nucleatum的丰度病例组高于对照组(0.142±0.207 vs0.031±0.024,P<0.05);唾液样本中F.nucleatum的丰度病例组稍高于对照组(0.040±0.066 vs 0.028±0.030,P=0.159);粪便样本中F.nucleatum的丰度(病例组)稍低于对照组(0.0002±0.0010 vs 0.003±0.015,P=0.249)。4.同一个体不同组织来源样本中F.nucleatum丰度的一致性分析:食管鳞癌患者,唾液中F.nucleatum的丰度与癌组织中比较,有一致性,但对临床指导意义不大(pearson相关系数为0.345,P=0.01);非癌对照人群中唾液F.nucleatum丰度与食管正常组织比较,有一致性,但对临床指导意义不大(pearson相关系数为0.327,P=0.023);无论是病例组还是对照组粪便与组织、粪便与唾液之间F.nucleatum丰度无一致性(P>0.05)。5.F.nucleatum与食管鳞癌临床病理特征之间的关系:食管鳞癌组织中F.nucleatum丰度与p TNM分期有关。100例食管鳞癌患者中p TNM分期为I期患者的F.nucleatum感染率为28.6%;II期感染率为21.1%;III期感染率为57.1%;IV期感染率为83.3%,差异有统计学意义(X~2=15.891,P=0.001);食管鳞癌组织中F.nucleatum丰度与患者的性别、年龄、p N分期、肿瘤最大径、分化程度及浸润深度均无相关性(P=0.755、0.281、0.572、0.807、0.545、0.324)。结论:获取口腔唾液、粪便及癌组织样本,分别抽提细菌DNA,Q-PCR法检测F.nucleatum在三种样本中的表达情况。以45例非癌人群的唾液、粪便及正常食管组织作为对照。采用单因素方差分析、卡方检验比较F.nucleatum在三种样本的表达差异,分析F.nucleatum与临床病理特征的关系;K-M法分析癌组织的F.nucleatum与生存预后的关系。