樟子松根部DSE真菌和土壤功能菌的分离鉴定及不同生长状况樟子松根内真菌的差异分析

来源 :内蒙古农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:aaitata
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樟子松(Pinus sylvestris var.mongolica)是我国“三北”防护林的主要树种之一,同时在内蒙古自治区地区大量引种栽植,但目前樟子松出现一系列退化问题,导致樟子松长势衰退甚至影响其自然更新。樟子松根系共生菌是保证植物-土壤营养循环的重要媒介,同时可以帮助樟子松提高抗逆性,对樟子松生长方面发挥重要作用。因此本研究采用传统微生物分离方法和分子生物学方法从内蒙古不同地区樟子松根部分离鉴定DSE真菌和其它土壤功能菌,发掘优良微生物菌种,探究不同地区间樟子松根部土壤可培养微生物的群落差异,采用高通量测序方法结合樟子松根际土壤的特征分析樟子松退化与根系共生真菌群落结构之间的关系及主要影响因子。主要研究结果如下:(1)通过选择培养基培养分离并鉴定得到105株DSE真菌,分别属于Phialocephala、Paraphoma、Cadophora、Leptodontidium四个属,共计20种。Cadophora orchidicola和Leptodontidium sp.和Cadophora orchidicola只在内蒙古东部地区的樟子松根系样品中分离得到;在内蒙古中部地区分离得到的菌种种类最多,Cadophora cf.meredithiae、Phialocephala helvetica和Cadophora malorum其他地区分离出来;Paraphoma chrysanthemicola仅在内蒙古西部地区样地分离得到。分离得到53种功能细菌,其中固氮功能菌18种,解钾功能菌20种,解磷功能菌15种,有部分菌株兼具两种功能。固氮菌主要分布属为Phyllobacterium、Flavobacterium、Variovorax、Cupriavidus、Mucilaginibacter、Neorhizobium、Xanthomonas、Pedobacter、Stenotrophomonas、Rhodococcus、Caulobacter、Massilia和Azotobacter;解钾细菌的分布属为Rhizobium、Pseudomonas、Paraburkholderia、Cupriavidus、Phyllobacterium、Duodenibacillus massiliensis、Microbacterium、Agrobacterium、Serratia、Acinetobacter、Inquilinus、Arthrobacter和Sphingomonas;解磷细菌包含的属为:Rhizobium、Pseudomonas、Paenibacillus、Serratia、Acinetobacter、Pseudomonadaceae、Bacillus、Chitinophaga和Paenibacillus。(2)对阿拉善、包头、鄂尔多斯和呼伦贝尔四个样地的根际土进行检测分析,除脲酶外,其他五种酶活性均表现为天然樟子松林根际土壤酶活性大于人工樟子松林,人工樟子松林健康组高于退化组;天然林的土壤p H值显著低于人工林,天然樟子松林根际土壤电导率最高,同时表现出相同样地健康樟子松根围土样品的电导率要大于退化樟子松。(3)ITS高通量测序共鉴定到805个ASV(OTUs),隶属于8门114科188属。担子菌门和子囊菌门是其中的主要类群,约占总数的96%左右,同一地点不同健康程度樟子松根内真菌群落存在差异,相同健康水平不同区域间樟子松根内真菌群落同样存在差异。呼伦贝尔地区天然樟子松林的多酚氧化酶、过氧化物酶、碱性蛋白酶、纤维素酶和碱性磷酸酶活性菌高于内蒙古西部区的人工林组,并且大部分达到了显著程度(P<0.05)。(4)樟子松根内真菌可以分类为腐生营养型、共生营养型和病理营养型三大类,共生营养型真菌占主要地位。健康组中阿拉善地区樟子松根内病理营养型相关真菌相对丰度与土壤性质均不存在显著相关性(P>0.05),腐生营养型真菌相对丰度与土壤纤维素酶丰度呈显著负相关(P<0.05),退化组中过氧化物酶活性与阿拉善地区的共生营养型真菌丰度呈极显著负相关(P<0.01)土壤p H值与鄂尔多斯地区样品的共生营养型和腐生营养型真菌分别表现出显著负相关和正相关关系(P<0.05)。电导率与各个地区的不同营养型之间都不存在显著性关系。
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