据统计,恶性肿瘤现已成为导致人类死亡的主要原因之一,严重危害人类健康。2020年全球新增恶性肿瘤中,胃癌的发病率仅次于乳腺癌,肺癌,结肠直肠癌,前列腺癌,居第五位。在中国,根据2015年的一项统计结果显示,我国胃癌发病率仅次于肺癌。胃癌成为世界公共卫生难题之一。新城疫病毒（Newcastle disease virus,NDV）作为溶瘤病毒的一种,有着广阔的研究前景。本研究以糖酵解为出发点,通过体外实验和生物信息学分析,研究NDV对胃癌细胞MKN-28糖酵解的影响,寻找关键治疗靶点。首先,常规传代培养胃癌MKN-28细胞。NDV体外感染MKN-28细胞,CCK-8的方法用于检测NDV在不同浓度和时间对胃癌细胞的影响,然后收集NDV感染的MKN-28细胞,离心洗涤,加入Annexin V-FITC及PI孵育,流式细胞仪检测细胞凋亡情况。然后应用微板法检测NDV感染后的MKN-28细胞的培养基中乳酸含量的变化以及细胞中ATP含量的变化,使用GOPOD氧化酶法检测NDV感染后的MKN-28细胞的培养基中葡萄糖含量的变化情况,并通过western blot检测LDHA蛋白的变化情况;用Hoechst33258染色法观察感染NDV的MKN28细胞在应用糖酵解抑制剂2-DG前后的细胞核变化。最后,通过生物信息学分析,从GEO在线网站获得基因表达谱GSE2685和GSE35809,然后进行差异基因筛查、GO和KEGG分析、PPI和生存分析,以找到糖酵解的关键目标基因。CCK-8结果表明,NDV能显著抑制细胞增殖,其抑制作用在一定范围内具有时间和剂量依赖性。流式细胞采用Annexin V/PI双重染色检测MKN-28细胞凋亡率,结果显示NDV可诱导MKN-28细胞发生凋亡,且凋亡率随作用时间的延长而增高。培养基中葡萄糖含量随着时间的增加而增高,乳酸产量随着时间的增加而降低,细胞内ATP产量随着作用时间的增加而降低,这表明NDV可以抑制MKN-28细胞糖酵解的发生。在western blot发现LDHA随感染时间的延长蛋白表达下降,更进一步证实了以上判断。2-Deoxy-D-glucose是一种葡萄糖类似物,为葡萄糖代谢抑制剂,通过作用于己糖激酶（hexokinase）来抑制糖酵解（glycolysis）。经Hoechst33258染色显示,与仅感染NDV F3的细胞相比,2-DG预处理后细胞核透明、固缩和碎裂的数量显著增加,说明抑制糖酵解可提高NDV F3诱导MKN-28发生凋亡的作用。通过生物信息学分析筛选出的关键基因LDHA有可能作为NDV F3通过糖酵解方面治疗胃癌的突破口。其他关键基因还有PFKM、PFKP、PKLR、PGAM2、PGAM1、PGK1、PGM2、PGK2（PGKPS）、PFKM、ACSS2和G6PC2等。上述研究为应用NDV F3进行胃癌的生物治疗提供了理论依据和更多选择。