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玉米丝黑穗病是由丝轴黑粉菌(Sporisorium reilianum)引起的严重威胁玉米产量的主要病害之一。作为我国玉米主产区之一的吉林省,该病也大面积发生,已经成为限制吉林省玉米单产和总产提高的制约因素。采用种子包衣等技术可以减少丝黑穗病的发病,但增加了玉米生产成本和环境压力。选育抗病品种是解决玉米丝黑穗病的经济有效途径,而研究玉米丝黑穗病发病条件并创制抗病育种材料是其重要前提。到目前为止,经我国几代农业科学工作者的努力,对玉米丝黑穗病症状、病原菌、侵染循环、侵染规律等都已研究得比较清楚。然而,对玉米抗丝黑穗病发病条件的关键制约因素研究的却很少,限制了对育种材料的有效鉴定和选择,更缺乏对抗丝黑穗病分子标记辅助育种的应用研究。对丝黑穗病抗病QTL的定位是开展分子标记辅助育种工作的前提和基础。吉林省农业科学院与中国农业大学合作,利用高抗丝黑穗病自交系吉1037与感病黄早四杂交和回交群体进行玉米丝黑穗病抗病基因的精细定位研究与作图。将抗病基因定位在第二染色体(bin2.09)和第五(bin5.03)染色体区段,发展SNP、CAPS、STS共6个标记,最终将主效QTL限定在分子标记STS6及STS8的170kb抗病区段qSHR1范围内,在此区间发展14个分子标记,每个标记平均物理距离只有lOkb,小于0.2cM遗传距离。为了提高抗丝黑穗病的选择效率和育种进程,大幅提高我省玉米抗病育种水平,本研究拟开展在明确玉米丝黑穗病发病条件的关键制约因素的基础上,探索人为控制发病条件,创新人工接种鉴定技术,特别是在海南的接种鉴定技术,为玉米抗丝黑穗病QTL定位研究提供了技术保障。同时,利用与中国农业大学合作研究开发的主效QTL分子标记,将分子标记辅助选择与常规育种相结合,采用杂交-回交-自交的方法,建立玉米抗丝黑穗病分子标记育种平台。主要试验结果如下:通过研究不同接种浓度对玉米抗病和感病品种丝黑穗病发病率的影响,我们认为当接种浓度≥0.1%时,侵染率达到最大值,发病率不会因为接种浓度(土壤中病菌浓度)的增加而升高。也就是说当土壤中丝黑穗病菌浓度达到一定数目时,侵染率即可达到最大值,发病率不会因为土壤中病菌浓度的增加而升高。方差分析表明,在≥0.1%接种浓度条件下,不同接种浓度对玉米丝黑穗病发病率的影响差异不显著,感病品种与抗病品种之间差异达到极显著水平。通过不同播期对玉米丝黑穗病发病率的影响研究,得知夏播也能够使玉米发病。通过对感病品种不同组织器官的DNA检测发现,茎髓组织的DNA要比叶片的DNA更精准可靠。据此明确了玉米丝黑穗病侵染率与发病率存在差异,且侵染率大于发病率,并通过对茎髓DNA进行特意引物的PCR分子检测而得到证实。通过水分胁迫处理接种5叶后玉米幼苗研究发现,水分胁迫处理比对照(正常降水)的发病率显著提高,发现并说明出苗后水分胁迫是诱发玉米丝黑穗病发生的主要限制因素之一。由此我们提出在异地通过模拟控制发病条件,不但在北方,而且在海南进行较为准确的丝黑穗病接种鉴定成为可能。海南接种鉴定技术的成功,为抗病性鉴定提供了一种新的有效方法,使得自交系和杂交种选育材料过程中的抗病鉴定由每年的一季变为两季,加速了玉米抗丝黑穗病育种的研究进程。本研究经过一代杂交、6代回交、2代自交的选择,成功选育了黄早四近等基因导入系,为QTL精确定位提供了基础材料。获得的27份黄早四近等基因导入系,无论从表型还是配合力,都已经非常接近黄早四,从而解决了育种和生产过程中黄早四不抗玉米丝黑穗病的难题。对吉林省玉米吉853、8902、JV022等10个骨干自交系与高抗自交系吉1037进行杂交,回交转育,对后代材料在人工接种抗病鉴定的基础上,利用与中国农业大学合作开发紧密连锁的抗病QTL区段内的分子标记进行抗丝黑穗病分子标记选择,经一代杂交,5代回交,2代自交获得了161份纯和抗病基因型自交系,99.38%达到中抗以上水平,其中高抗占77.02%,成功的将10个骨干自交系的抗性提高到抗以上水平,其中高抗自交系占40%。利用改良后的10个抗病骨干自交系,组配优良抗病杂交组合,效果显著。本文针对对吉单209和吉单517的改良做以概述。在不改变其它农艺性状的前提下,利用抗病8902改良系改良吉单209,改良后的吉单209抗病杂交组合超过配制组合的77%,84.6%的杂交组合产量增幅在10%以上,最高达到26.7%;利用抗病JV022改良系改良吉单517,改良后的吉单517抗病杂交组合达到80%,62.5%的杂交组合产量超过14%,最高达到23.4%。利用吉853改良系改良吉单209和吉单517,改良后的杂交种全部表现为抗性,81.8%的杂交组合增产超过10%,最高达到13.8%和19.9%;同时利用8902改良系和吉853改良系改良吉单209,改良后的吉单209抗病杂交组合超过配制组合80%,93.3%抗病杂交组合产量增长超过12%。利用10个抗病骨干自交系改良杂交种,无论是抗性还是产量,双亲都是抗病改良系的杂交种的效果明显优于单个亲本为抗病改良系的杂交种。因此即使在玉米丝黑穗病大发生年份,仍会使之表现为高抗、高产稳产。