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目的:就目前来说,异基因造血干细胞移植(allogeneic hematopoietic stem cell transplantaion,allo-HSCT)依然是治愈某些恶性血液病最有效的一种手段。但是,移植物抗宿主病(graft-versus-host disease,GVHD)是移植后最为严重的并发症。杀伤细胞免疫球蛋白样受体(killer cell immunoglobulin-like receptors,KIR)在alloHSCT的免疫中发挥重要作用。受者体内缺乏供者抑制型KIR的相应配体,可致供者自然杀伤(natural killer cell,NKs)细胞产生异源反应性,杀伤受者树突状细胞(dendritic cell,DC)减低GVHD的发生率。目前,在体外通过封闭抑制型受体活化供者NK细胞,对受者DC细胞进行杀伤,并将供者KIR基因型表达情况与临床单倍体allo-HSCT预后相结合,探讨供者KIR与受者HLA模式,为HSCT选择最佳供者的研究并不多。本实验分为两个部分:一部分在体外利用抗CD158a及CD158b的单克隆抗体对供者NK细胞表面抑制型受体KIR2DL1及KIR2DL2/L3进行封闭,研究供者NK细胞对受者DC的杀伤作用;另一部分回顾分析了接受单倍体allo-HSCT的急性白血病患者一般资料,探讨KIR/HLA受配体模式对单倍型HSCT预后的影响,为在临床找寻最佳移植供者以及联合NK细胞过继输注改善HSCT预后提供参考。第一部分体外修饰供者NK细胞杀伤受者DC减轻GVHD的作用研究方法:选取2010年5月至2014年12月行单倍体allo-HSCT的5例急性白血病患者及相应供者分别作为研究对象。采用序列特异性引物聚合酶链反应(即PCR-SSP)法,对5对供/受者移植前检测KIR和HLA分型,分别采集供受者外周血单个核细胞,使用NK细胞分选试剂盒对供者NK细胞进行富集,并以其作为效应细胞,而取受者DC作为实验靶细胞,利用抗CD158单抗分别对供者表面KIR抑制型受体进行封闭,并采用CCK-8比色法分别比较抑制性KIR封闭前后的NK细胞对DC的杀伤作用。结果:同一效靶比(10∶1)下,供者NK细胞表面抑制性受体封闭后,对受者DC的杀伤活性明显升高,通过调整封闭抗体高浓度可提高其杀伤活性,组间差异有统计学意义(P<0.05)。单一封闭KIR2DL2/L3受体表位,在同一效靶比(10∶1)下,供受者KIR2DL1/C1组对靶细胞杀伤效果高于受者为C2及C1/C2组,用不同浓度的CD158a单抗进行封闭,随封闭抗体浓度的增加,杀伤效果增强。第二部分单倍型异基因造血干细胞移植治疗急性白血病疗效观察方法:回顾整理5例之前接受单倍体allo-HSCT的患者资料,移植前均使用改良白消安/环磷酰胺(Bu/Cy)+抗人胸腺细胞球蛋白(ATG)进行预处理。结果:5例受者均成功完成供者干细胞的持久植入。中性粒细胞(需连续3d)计数≥0.5×109/L的中位时间是13d,血小板(不输并且连续7d)计数≥20×l09/L的中位时间是18d。表达KIR2DL1、KIR2DL2/3且KIR2DS1阳性供者对C2/C2组受者在移植后造血重建较快、急慢性GVHD发生率较低、移植后感染情况较轻。结论:利用抗CD158单抗封闭供者NK细胞表面抑制型受体KIR2DL1及KIR2DL2/L3可以提高供者来源NK细胞对受者DC的杀伤活性;供受者KIR2DL1/C1组对DC杀伤效果可能高于受者为C2及C1/C2组;在单倍型allo-HSCT中,供者同时表达KIR2DL1、KIR2DL2/3且KIR2DS1表达阳性,可能对C2组受者的预后更好;探究供者KIR受者HLA模式能为之后移植供者的最优选择提供分子依据。