动作电位和钙离子对背根神经节细胞胞体分泌和胞饮的调控研究

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动作电位和钙离子信号对神经细胞的分泌和囊泡转运是至关重要的,通常认为动作电位可以打开电压门控的钙通道导致钙离子内流,胞内钙离子升高导致钙离子依赖性的胞吐。但动作电位本身也就是电压在分泌中所起的作用并不清楚,胞内钙库以及钙致钙释放在分泌中所占的比例也有待进一步的研究。 本文采用膜电容测量、钙离子的紫外光解和测量以及FM染色等方法,研究动作电位和钙离子对脊髓背根神经节(dorsal root ganglion,DRG)细胞分泌和胞饮的影响,以及DRG细胞胞体分泌的生理意义。结果如下:(1)在生理情况下,由动作电位引起的DRG细胞分泌包含两个组分:钙离子依赖性的分泌(calcium dependentsecretion,CDS)和不依赖钙离子而只依赖电压的分泌(Calcium-independent butvoltage-dependent secretion,CIVDS),其中CIVDS的囊泡池依赖于CDS囊泡池。这两个组分对分泌的贡献受动作电位个数和频率的调控,在动作电位个数很少或频率很低的情况下,CIVDS在整个分泌中占主要地位;在动作电位个数多或频率高的情况下,经典的CDS占主要地位。高频的动作电位可以升高胞内蛋白激酶A(proteinkinase A,PKA)的活性,从而加速与CIVDS紧密偶联的快速胞吞(rapid endoeytosis,RE),这种RE是不依赖钙离子和dynamin的。(2)首次在DRG胞体上发现钙火花并初步探讨了钙火花在胞体分泌过程中的作用。由RyR3介导的钙火花主要分布在近质膜区:caffeine或DMPX都可以引发钙火花并引起胞体分泌:在兴奋.分泌耦联过程中,抑制钙致钙释放会使DRG神经元胞体Ca<2+>依赖的分泌信号下降60%。(3)胞体分泌对相临DRG细胞的电流和分泌没有明显影响,这暗示DRG胞体分泌的递质并不通过离子型受体起作用,P物质(substance P,SP)是由DRG分泌的与痛相关的神经肽递质,可以与胞体上的自受体结合,引起明显的胞饮现象,这种胞饮可以被SP受体的拮抗剂所阻断。 综上所述,本文进一步揭示了DRG神经元胞体上存在的去极化直接介导的分泌,发现了神经钙火花及其介导的钙致钙释放在DRG胞体分泌过程中的重要作用,并初步探讨了DRG细胞胞体分泌对自身受体的转运作用。这对现有的神经递质分泌机制是一扩展并对今后的DRG细胞胞体分泌和胞饮研究提供了基础。
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