用酶法评定鸭饲料代谢能的方法学研究

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本研究根据鸭在常态条件下小肠液中消化酶酶谱的变异幅度,设计了与鸭小肠液中消化酶活性近似的人工小肠液,建立了以胃蛋白酶—人工鸭小肠液两步酶水解法估测鸭饲料代谢能值的离体评定方法,为构建我国水禽饲养标准的有效能值参数提供了现代化的测定手段。 本论文第一部分模拟鸭小肠液酶谱首先需要在克服应激条件下获得足够量的小肠液的手段,关键技术是采集食糜的T型套管设计。本试验在参照猪、牛、羊小肠套管的基础上优选出了可持续采集食糜的专用套管及配套的食糜采集的方法。结果表明,本试验设计的套管对肠道的损伤轻微,肠道与腹脂的粘连率少。试验鸭安装套管后15天内能恢复到术前体重。经套管收集的食糜量平均可达20.2ml/h。 第二部分为了获得一般生产条件下,鸭小肠液消化酶酶谱的变异幅度,就通过简单T型套管获得有代表性肠液的采样方案及日粮营养水平对鸭小肠液消化酶活性的影响进行了研究。结果表明,北京鸭在自由采食、饮水的条件下,小肠液中消化酶活性具有昼夜节律及日间变化。代表性肠液的采样方案为,采样时间为9:30~18:30,每次采集1h,每次采样后间隔3h,然后重复采样过程。一天共采集3次,隔日重复采样过程1次,共采集3天。日粮能量水平对鸭小肠液消化酶活性没有显著地影响,而蛋白质水平对小肠液中淀粉酶、胰蛋白酶、糜蛋白酶有显著地影响。在一般生产条件下,北京鸭空肠液中消化酶活性的变异范围分别为:淀粉酶308.26~408.15U/ml,胰蛋白酶74.51~101.77U/ml,糜蛋白酶32.14~48.20U/ml,脂肪酶0.79~1.22U/ml,蔗糖酶5.27~5.41U/ml,麦芽糖酶24.57~30.32 U/ml。 第三部分为了确定胃蛋白酶—人工鸭小肠液的最适酶水解条件参数,就胃蛋白酶、人工鸭小肠液酶水解的温度、时间、pH等条件进行了研究。结果表明,酶水解法中,胃蛋白酶的浓度及人工肠液中酶的种类及活性可以代表鸭胃肠道中参与饲料消化的主要消化酶的生理水平。胃蛋白酶的适宜水解时间为3小时,水解温度为38℃。人工小肠液酶水解的最适pH为6.6,适宜水解时间为22小时。 第四部分为了通过酶水解物总能值(EHGE)估测鸭饲料的生物学法代谢能值,以玉米为例研究了以酶法测值估测生物学法代谢能值的数学模型。结果表明,以玉米酶法测值回归校正到鸭排空强饲法代谢能值的数学模型为:AME=2.639+0.897×EHGE(CF<2.8),AME=3.890+0.788×EHGE(CF>2.8)(P<0.01;RSD=0.166MJ/kg);TME=3.625+0.905×EHGE(CF<2.8),TME=4.950+0.792×EHGE(CF>2.8)(P<0.01;RSD=0.166MJ/Kg)。酶法AME估测值与生物学法的偏差范围为-0.353 MJ/Kg~0.343 MJ/Kg,TME的偏差范围为-0.371MJ/Kg~0.335 MJ/Kg。用酶法估测玉米的代谢能值可以达到与生物学法类似的精度。且酶法的估测精度明显地高于化学法。 第五部分以玉米为例检验了酶法估测鸭饲料代谢能值的精度及重演性。结果表明,用酶法评定鸭饲料中玉米的代谢能值具有较好的重演性及较高的精度。6种被检玉米的酶法AME估测值与生物学法实测值的偏差范围为-0.05MJ/Kg~0.303 MJ/Kg,TME为-0.065 MJ/Kg~0.294MJ/Kg。酶水解法可以达到满足生产要求的定量水平。
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