红叶石楠组织培养快繁技术的优化

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本文对红叶石楠(Photinia fraseri)组织培养快速繁殖技术的优化进行了比较系统的研究。由外植体的选择、灭菌的方式、不定芽的启动、继代增殖到不定芽的生根。采用稀土元素硝酸铈对红叶石楠分化苗的生物量和生理生化效应进行了比较深入的研究;突出研究红叶石楠难生根问题,提出分别采用MET、暗培养、间苯三酚、稀土元素硝酸铈等因子对其生根能力的影响;同时提出采用培养基支持体—珍珠岩、蛭石培养生根苗,其生理生化指标发生了很大的变化,其根系活力增强,根的过氧化物酶活性提高,瓶苗的移栽成活率有了很大的提高。为红叶石楠能够迅速进入生产提供了一条行之有效的方法,同时为难生根植物提供了一定的理论依据。下面就本论文的主要结果汇报如下:1、采用顶芽以下第3-6个芽位的茎段作为外植体,其出芽率高、褐化较轻;用间歇消毒法消毒污染率较低;红叶石楠最佳的启动培养基为MS+BA2.0 mg·L-1+NAA0.05 mg·L-1+蔗糖30g,+琼脂7g,pH为5.8~6.2。2、继代增殖最适宜的培养基为MS+BA1.0 mg·L-1+NAA0.05 mg·L-1+蔗糖30g,+琼脂7g,pH为5.8~6.2。其平均增殖倍数为4.9,平均苗高达3.2cm。3、低浓度的稀土元素提高红叶石楠分化苗的质量,因而促进红叶石楠组培苗芽的分化生长。而高浓度的稀土溶液,影响甚至抑制植物生长发育,从而使红叶石楠组培苗分化芽减少,单株鲜重和单株叶片减少。4、稀土溶液Ce(NO3)3在较低的浓度范围(0.5~5 mg·L-1)内,随稀土溶液浓度的增加,可溶性蛋白质含量增加,尔后随着稀土溶液浓度增加,可溶性蛋白质就逐渐减少。稀土溶液浓度越大,对可溶性蛋白质的负效应就越明显。叶绿素含量和POD活性同理。5、为了提高红叶石楠的生根率,探讨了多种因子如MET、间苯三酚、暗培养及稀土元素Ce对红叶石楠生根率的影响,发现MET0.5mg/L与暗培养7d有利于红叶石楠的生根,使用1/2MS+NAA0.5 mg·L-1 +IBA0.3 mg·L-1+ MET mg·L-1培养基,其生根率达到90%,生根数到6.5条。6、低浓度的Ce(NO3)3促进红叶石楠生根苗的生长及生根质量,增加叶绿素含量,提高其生根苗的根数和根系总长;高浓度的Ce(NO3)3,影响甚至抑制植物生长发育。7、以珍珠岩和蛭石为培养基支持体,平均每株生根数和移栽成活率均好于琼脂,其中珍珠岩为培养基支持体平均每株生根数达23.8条,生根率高达96.6%,移栽成活率达到95.9%;不同的培养基支持体红叶石楠组培苗根系活力及POD活性是不同的。琼脂的根系活力及POD活性最低分别为225.5μg·g-1·h-1和3.5△A470min-1·g-1,珍珠岩的根系活力及POD活性最高,根系活力达到576.159μg·g-1·h-1,POD活性达到27.08△A470min-1·g-1。由此说明以珍珠岩为培养基支持体能保持较高的根系活力,保持较高的吸收、运输等功能。
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