中国叶上衣属分类及糙聚盘衣物种资源生物学研究

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由于地衣多样性和系统性研究是自然界地衣多样性与地衣资源研发之间的桥梁,本研究结合《中国地衣志》编前研究任务进行叶上衣属地衣物种多样性与系统性生物学并结合沙漠生物地毯方向进行糙聚盘衣物种资源生物学研究。  通过对采集自我国热带、亚热带地区的800余份叶上衣属地衣标本,在形态学、解剖学、化学、地理分析和系统发育学综合分析的基础上研究,得出以下结果:  (1)获得了该属ITS rDNA序列430条,SSU rDNA65条,LSU rDNA87条,TEF1-α120条,RPB271条。通过多基因联合的系统发育学分析,同时与表型相结合,将原来的叶上衣属重新划分为6属,除狭义的Strigula属外,其中3属为新属,另外2属为恢复原叶上衣科的Raciborskiella属和Phylloporis属。  (2)基于LSU和SSU序列,用更多的分子数据进一步证明了叶上衣属应置于座囊菌纲独立的目叶上衣目。  (3)本研究从叶上衣科3个属的14个物种中扩增得到28条LSU全长序列(3071-4352bp)。以该属模式种Strigula smaragdula为模板,在LSU rDNA全序列中找到了其中10个结构区。通过核苷酸序列的比对分析,鉴定出狭义叶上衣属6条特有的核苷酸序列。  (4)本研究记载和详细描述了中国叶上衣属地衣30种,其中包括14个新种和6个中国新记录种。对复合种Strigula smaragdula和S.nitidula进行了研究,并支持S.difformis和S.hypothelia分别提升为种的水平,不再作为变种和变型处理。  (5)采用LSU和TEF联合基因片段进行系统发育学分析发现石生种类Strigula jamesii形成的分支与叶上衣科另外2属Flavobathelium和Phyllobathelium嵌合在一起,表明该种并不是真正意义的Strigula成员,本论文将其处理为恢复原属Geisleria的成员。  对糙聚盘衣属物种资源进行了相关研究,研究结果如下:  (1)通过对地衣型真菌的抑菌活性初筛发现,糙聚盘衣属两种的共生菌甲醇浸提液具有抑制革兰氏阳性菌和阴性菌的活性。  (2)通过与地衣体次级代谢产物丰度比较发现,糙聚盘衣属两种共生菌次级代谢产物丰度均高于其对应地衣体。  (3)从Glypholecia scabra分离培养的共生菌中通过各种柱层析技术分离获得了7种代谢产物,利用各种现代波谱技术已解析6个化合物的结构,包括5种聚酮类化合物和1种含硫的二酮哌嗪类化合物,均为首次在地衣中报道。  (4)同时,从该属另一种Glypholecia sp.纯培养的共生菌中分离获得1个萘醌类化合物和2个生物碱类新化合物。目前,正在进行新化合物单晶培养,通过X-Ray单晶衍射的方法确定其绝对构型、并对其相关活性如细胞毒活性、抗病原真菌等进行测试。  基于目前的研究结果表明,分离培养的地衣共生菌能产生多于共生状态地衣体的、并具有一定生物活性的次级代谢产物,具有开发优势和价值,可作为挖掘真菌次级代谢产物生物合成潜力的有力材料。
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