【摘 要】
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B细胞肿瘤通常由于协同刺激分子低表达或者表达缺失导致T细胞无能和肿瘤免疫耐受。研究表明,用基因转染的方法使肿瘤细胞表达协同刺激分子可有效增强抗肿瘤免疫。然而,由于技术
【出 处】
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中国协和医科大学 北京协和医学院 中国医学科学院 清华大学医学部
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B细胞肿瘤通常由于协同刺激分子低表达或者表达缺失导致T细胞无能和肿瘤免疫耐受。研究表明,用基因转染的方法使肿瘤细胞表达协同刺激分子可有效增强抗肿瘤免疫。然而,由于技术尚不成熟、费时费力且无法保证安全性,基因转染的方法在临床应用中受到诸多限制。抗体介导协同刺激分子直接靶向结合于肿瘤细胞表面是一个可行性较高的替代方案。为此,我们将人CD80协同刺激分子的胞外区基因,与抗CD19单克隆抗体可变区基因重组,以表达hCD80/anti-CD19 scFv融合蛋白。该融合蛋白通过pET22b(+)表达载体在Rosetta(DE3)菌株中得以成功表达,并能特异性结合B细胞肿瘤表面CD19抗原。在体外实验中,该重组蛋白结合pre-B细胞系NALM-6细胞后,可诱导HLA-A2匹配的淋巴细胞增殖,分泌细胞因子并产生较显著的特异性细胞毒作用。用NALM-6细胞在严重免疫缺陷裸鼠(NOD/SCID)所建立的pre-B全身播散性白血病动物模型中,hCD80/anti-CD19 scFv重组蛋白联合输注HLA-A2匹酉己的淋巴细胞可显著延长小鼠的生存期。从而证实,该重组蛋白可使逃避免疫监视的B肿瘤细胞有效的转化成肿瘤抗原提呈细胞,进而激活特异性免疫反应。这种简便易行、应用对象广泛的重组蛋白,在未来用于临床治疗CD19+B细胞肿瘤具有较高的可行性。
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