BMP和BMP对CH10T干细胞向心肌样细胞分化的影响

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第一部分C3H10T1/2干细胞的培养、诱导,293细胞的培养,AdBMP5、AdBMP9重组腺病毒的扩增 目的:利用细胞诱导技术完成AdBMP5. AdBMP9重组腺病毒质粒对C3H10T1/2干细胞的诱导,并通过293细胞对AdBMPs. AdBMP9重组腺病毒质粒进行扩增,为进一步阐明在BMP5. BMP9在C3H10T1/2干细胞向心肌细胞分化过程中的影响奠定基础。 方法:以293细胞为工具细胞,对AdBMP5. AdBMP9重组腺病毒质粒进行扩增;以浓度为2.67 ml/LAdBMP9重组腺病毒感染C3H10T1/2干细胞,并浓度为3.75ml/LAdBMP5重组腺病毒感染C3H10T1/2干细胞。 结果:AdBMP5.AdBMP9重组腺病毒可被293细胞成功扩增;AdBMP5.AdBMP9重组腺病毒感染C3H10T1/2干细胞的感染效率分别为36%和34%。 结论:通过293细胞对AdBMP5. AdBMP9重组腺病毒扩增,病毒滴度被提高;AdBMP5.AdBMP9重组腺病毒可成功感染C3H10T1/2干细胞。 第二部分 BMP5和BMP9对C3H10T1/2干细胞向心肌样细胞分化的影响 目的:研究骨形态形成蛋白5(bone morphogenetic proteins5,BMP5)和BMP9在C3H10T1/2干细胞向心肌细胞分化过程中的影响。 方法:以浓度为3.75ml/L的AdBMP5重组腺病毒质粒感染C3H10T1/2干细胞,并以浓度为2.67 ml/L的AdBMP9重组腺病毒质粒感染C3H10T1/2干细胞,诱导后1周和2周应用RT-PCR方法及激光共聚焦方法分别检测C3H10T1/2干细胞中心肌特异转录因子及特异性蛋白的表达变化。2周后应用电子显微镜观察细胞超微结构的改变。 结果:C3H10T1/2干细胞经AdBMP5. AdBMP9重组腺病毒诱导1、2周后,细胞体积明显变大,排布走向趋于一致,细胞间连接紧密,折光性增强。细胞中开始出现心肌特异性转录因子NKx2.5、GATA-4、MEF2C及心肌特异性表达蛋白连接蛋白43(connexin43,Cx43)和心肌特异性肌钙蛋白T(cardiac isoform of Tropnin T,cTnT)的表达;2周后出现心肌特异性超微结构肌丝和闰盘。 结论:BMP5.BMP9很可能影响体外培养的C3H10T1/2干细胞定向分化为心肌样细胞。
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目的:探讨胱硫醚-γ-裂解酶(cystanthionine-γ-splitting enzyme,CSE)与硫化氢(Hydrogen sulfid,H2S)系统在肺缺血一再灌注损伤中的作用。方法:健康SD大鼠随机分成4组,假手术对照组(sham组),肺缺血一再灌注组(LIR组),肺缺血一再灌注+硫氢化钠组(LIR+NaHS组),肺缺血一再灌注十炔丙基甘氨酸组(LIR+PPG组),每组10只。麻醉后
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目的:回顾性分析偶然性Ⅲa,(N2)期非小细胞肺癌(non-small-cell lung cance,NSCLC)的临床及预后因素,并进一步检测腺瘤息肉病(adenomateous polyposis coli,APC)基因,核苷酸切除修复交叉互补组1(excision repair cross-comp lementing1,ERCC1)和细胞角蛋白19(cytokeratin19,CK19)
目的:50%以上的药物难治性癫痫可受益于外科手术治疗。而术前准确定位癫痫灶是手术成功的关键。目前,18F-FDG PET脑代谢显像定位癫痫灶的研究较多,并被证实具有较高的定位灵敏性,但特异性较低。而应用13N-NH3 PET血流灌注显像定位癫痫灶的研究,国内尚未见报道,国外亦较少。本研究通过对31例药物难治性癫痫患者行13N-NH3、18F-FDG PET显像,初步总结癫痫灶发作间期血流、代谢显像
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上皮膜蛋白-1(Epithelial membrane protein-1,EMPl),又称为肿瘤相关蛋白(Tumor-associated membrane protein,TMP),是耐药肿瘤的标志物。通过对表皮生长因子受体(Epidermal growth factor receptor,EGFR)的作用,参与了肿瘤的耐药机制。由于耐药性肿瘤与耐药性癫痫在耐药机制中存在某些相似性,EMP1可