糖尿病和冠心病患者脂蛋白中血清淀粉样蛋白A的分布及其与脂蛋白功能的相关性研究

来源 :中国协和医科大学(北京协和医学院) 北京协和医学院 中国医学科学院 清华大学医学部 | 被引量 : 0次 | 上传用户:machao4
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本实验的目的在于评估冠心病和糖尿病患者脂蛋白中SAA含量改变对HDL诱导巨噬细胞胆固醇外流、抗LDL氧化能力,以及LDL氧化特性的影响。 方法: 1.收集单纯糖尿病患者、糖尿病合并冠心病患者以及单纯冠心病患者血浆样本; 2.通过密度梯度离心分离脂蛋白; 3.用酶联免疫吸附(ELISA)方法检测各种脂蛋白的SAA含量; 4.用佛波酯(PMA)诱导THP-1单核细胞系分化为巨噬细胞,用乙酰化LDL(ac-LDL)处理巨噬细胞获得泡沫细胞; 5.泡沫细胞中加入不同患者的HDL,孵育24小时; 6.用酶法结合高效液相色谱法(HPLC)测定细胞内外的游离胆固醇和总胆固醇含量,从而获得巨噬细胞胆固醇外流率; 7.通过检测紫外吸收OD234nm测定脂质氧化程度,评估SAA含量与LDL氧化特性的相关性; 8.通过检测OD234nm测定脂质氧化程度,评估SAA含量与HDL抗LDL氧化保护功能的相关性; 9.应用SPSSV11.0.1软件,采用单因素方差分析和多因素logistic回归分析处理检测结果,进行相关性分析。 结果: 1.入选患者各组间基础人口统计学特点、临床生化指标和既往病史无明显统计学差异(p>0.05); 2.HDL中SAA的量明显高于LDL和VLDL+CM(p=0.002); 3.HDL中SAA含量在冠心病合并糖尿病和单纯冠心病患者中较高,单纯糖尿病患者中较低(p=0.033);糖尿病患者VLDL+CM中SAA含量均较非糖尿病患者高(p=0.013),LDL-SAA存在升高趋势(p=0.091); 4.糖尿病人群的总胆固醇外流率和游离胆固醇外流率均明显下降(p值分别为0.016和0.021);高HDL.SAA组的总胆固醇外流率高于低HDL-SAA组(p=0.036); 5.糖尿病患者与非糖尿病患者相比,LDL氧化OD<,max>值较高(p=0.015),但氧化延滞时间也延长(p=0.028); 6.LDL-C是LDL氧化OD<,max>值的正相关独立影响因素(偏回归系数为1.563,wald=5.345,p=0.021); 7.与非冠心病患者相比,应用冠心病患者HDL后LDL氧化OD<,max>值明显较高(P=0.035),氧化延滞时间有下降趋势(p=0.091); 8.高HDL-SAA组的LDL氧化延滞时间明显缩短(p=0.003)。 结论: 1.SAA主要存在于HDL中;其他脂蛋白中可以有少量分布; 2.冠心病患者HDL中SAA含量明显升高;与非糖尿病患者相比,糖尿病患者的LDL和VLDL+CM更容易结合SAA; 3.糖尿病患者HDL促进细胞内胆固醇外流的能力下降;HDL中SAA含量的升高可以促进细胞内胆固醇外流; 4.糖尿病患者的LDL易被氧化;LDL-C与LDL的氧化正相关; 5.冠心病患者的HDL抑制LDL氧化的能力下降;HDL中SAA含量的升高伴随着HDL抗氧化能力的下降。
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