韭菜迟眼蕈蚊性别决定关键基因tra2的克隆及功能探索

来源 :山东农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:litao2006
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韭菜迟眼蕈蚊Bradysia odoriphaga是我国特有的根蛆类害虫,尤喜食韭菜,分布广泛却又难以防治。目前韭菜迟眼蕈蚊的防治手段大多为化学防治,不科学用药不仅使昆虫的抗药性增加,而且极易导致人、畜中毒以及环境污染等问题。因此,寻找绿色、安全、环保的韭菜迟眼蕈蚊防治方法至关重要。在饲养中发现韭菜迟眼蕈蚊以产单一性别后代为主,产双性别后代较少,其性别决定机制及其应用价值引起我们的研究兴趣。本研究以韭菜迟眼蕈蚊为研究对象,对性别决定关键基因Botra2及其功能进行了初步研究,得到的主要结论如下:1、分离并鉴定了韭菜迟眼蕈蚊Botra2基因,得到了2个Botra2转录本且均为性别非特异性剪接。2、Botra2基因在整个韭菜迟眼蕈蚊的生长发育期(卵、幼虫、蛹、成虫)均有表达,蛹期和成虫期均有显著高表达,四龄幼虫到蛹期这一阶段表达量突增,且雌成虫中的表达量高于雄成虫。3、沉默了韭菜迟眼蕈蚊Botra2基因后,韭菜迟眼蕈蚊雌雄虫体内Botra2表达量均显著下调,且雌虫体内的Botra2得到了更好的抑制。4、对RNA干扰后的韭菜迟眼蕈蚊成虫进行内生殖器、外部形态测量以及雌虫产卵量、后代孵化率统计,发现其卵巢在形态上有一定程度缩短并且显示出一些缺陷特征,如比通常小,卵散乱、不规则等;雌虫体长和翅长有显著性的增长,相反,雄虫体长和翅长却显著性缩短,并且其外生殖器有一定程度的缩小;单雌产卵量和后代产卵率表现出显著降低。研究结果初步明确了韭菜迟眼蕈蚊Botra2基因的功能,并为害虫的绿色防控提供了研究基础。
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