【摘 要】
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冬凌草甲素(oridonin,ORI)为唇形科香茶菜属植物冬凌草(Rabdosia rubescens)的主要抗癌有效成分,分子中与环外亚甲基共轭的环戊酮结构是其抗癌活性中心。体外研究表明ORI抗癌谱较广
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冬凌草甲素(oridonin,ORI)为唇形科香茶菜属植物冬凌草(Rabdosia rubescens)的主要抗癌有效成分,分子中与环外亚甲基共轭的环戊酮结构是其抗癌活性中心。体外研究表明ORI抗癌谱较广,可通过多种途径诱导癌细胞凋亡,对人肝癌BEL-7402细胞,非小细胞肺癌组织NCI-H520、NCI-H460、NCI-H1299,人白血病HL-60细胞,食管癌CaES-17细胞及结肠癌HCT8细胞等均有明显细胞毒作用,临床上也显示了一定疗效。 冬凌草甲素来源于天然植物,成分含量低,提取工艺复杂,原料的短缺已成为制约其深入研究的因素之一。同时,由于ORI的水溶性差,体内生物半衰期短,目前有关制剂的抗癌疗效尚不理想,需进行深入研究。 针对上述问题,本文首次将超临界CO2萃取与柱层析分离技术联合应用于ORI的提取与分离,使ORI的制备工艺大大简化,对推动ORI向工业化生产方向发展具有重要意义。本文以ORI的提取率为考察指标,对夹带剂的种类和萃取时间进行了单因素考察,确定以95%乙醇为夹带剂效果最理想,萃取时间为3小时。通过正交实验对超临界CO2的萃取工艺进行优化,确定最佳工艺条件为:压力38.5 MPa,温度40℃,夹带剂用量1.5 ml·g-1。收集萃取所得产物用硅胶柱层析技术进一步分离,将所得结晶利用红外光谱,紫外光谱和核磁共振波谱等手段进行鉴定,结果证实所得结晶为冬凌草甲素,HPLC面积归一化法测得样品纯度为(98.2±0.5)%,能够满足医药应用要求。 以冬凌草甲素为实验药物,以具有良好生物相容性和生物可降解性的聚乳酸(polylactic-acid,PLA)为载体材料,采用改良的自乳化溶剂扩散法制备了冬凌草甲素聚乳酸纳米粒(ORI-PLA-NP)。实验以包封率为主要考察指标,通过均匀设计法对处方工艺进行了优化,确定最佳处方工艺为:Poloxamer 188%=1.0%,有机相:
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