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研究目的:分析蛋白质精氨酸甲基化转移酶1(protein arginine methyltransferase 1,PRMT1)在肝正常组织及肝癌组织中表达量的差别。检测PRMT1在三种肝癌细胞系(HepG2、Bel-7402及SMMC-7721)的基础表达量。探讨PRMT1对肝癌细胞增殖、迁移、侵袭等生物学行为的影响,并研究PRMT1在肝癌细胞上皮间质转化(epithelial mesenchymal transition,EMT)中作用,进一步探究其作用的分子机制。研究方法:在生物信息数据库中分析肝正常组织及肝癌组织中PRMT1的mRNA及蛋白质水平的表达,进一步分析PRMT1表达量与肝癌患者生存期的关系。用Western Blot、定量PCR分别检测HepG2、Bel-7402及SMMC-7721三种肝癌细胞中PRMT1蛋白质及mRNA的基础表达水平;用干扰质粒sh-PRMT1进行慢病毒包装,收集病毒感染PRMT1表达量相对较高的肝癌细胞,筛选稳转细胞株;构建PRMT1过表达Flag-PRMT1质粒并转染至PRMT1表达量相对较低的肝癌细胞中,用G418筛选稳定表达株,并用Western Blot、定量PCR分别检测干扰及过表达效率。用CCK-8实验、成克隆实验、细胞划痕实验、Transwell迁移实验、Transwell侵袭实验分别检测PRMT1对肝癌细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响。Western blot检测PRMT1对侵袭相关指标MMP2和MMP9蛋白表达量的影响。Western blot检测上皮间质转化相关指标E-cadherin、N-cadherin、Vimentin和Snail的蛋白水平的变化,及TGF-β/smad通路的相关指标TGF-β、smad2/3、p-smad2/3的蛋白表达量的变化,初步探明PRMT1促进EMT的分子机制。研究结果:与肝正常组织相比,肝癌组织中PRMT1的mRNA及蛋白质的表达水平均呈高表达(P<0.05)。PRMT1低表达的肝癌患者生存时间较PRMT1高表达的肝癌患者生存时间长(P<0.05)。三种肝癌细胞株中Bel-7402细胞中PRMT1蛋白及mRNA表达量最高,SMMC-7721次之,HepG2的表达量最低。干扰质粒sh-PRMT1进行慢病毒包装并感染PRMT1表达量相对较高的Bel-7402、SMMC-7721细胞株,Western blot、定量PCR检测结果表明sh-PRMT1在肝癌细胞中具有较强干扰效率(P<0.05)。过表达质粒Flag-PRMT1经测序验证构建成功,转染至PRMT1表达量相对较低的HepG2、SMMC-7721细胞株,Western blot、定量PCR检测表明Flag-PRMT1在肝癌细胞中具有较强过表达效果(P<0.05)。在Bel-7402、SMMC-7721细胞株中干扰PRMT1的表达后,肝癌细胞的增殖、克隆形成、迁移及侵袭能力均减弱,MMP2和MMP9的蛋白表达水平下降,上皮标志物E-cadherin蛋白表达水平上升,间质标志物N-cadherin、Vimetin和Snail蛋白表达水平下降(P<0.05)。TGF-β/smad通路的相关指标TGF-β、p-smad2/3的蛋白水平下降(P<0.05),smad2/3蛋白水平无明显变化。相反地,在HepG2、SMMC-7721细胞系中过表达PRMT1可以增强肝癌细胞的增殖、克隆形成、迁移及侵袭能力,提高MMP2和MMP9的蛋白表达水平,上皮标志物E-cadherin蛋白表达水平下降,间质标志物N-cadherin、Vimetin和Snail蛋白表达水平上升(P<0.05)。TGF-β/smad通路的相关指标TGF-β、p-smad2/3的蛋白水平上升(P<0.05),而smad2/3蛋白水平无明显变化。研究结论:PRMT1在肝癌组织中的mRNA及蛋白表达量较肝正常组织高,且PRMT1表达量与肝癌患者是生存期相关。PRMT1差异性表达于三种肝癌细胞系中。PRMT1促进肝癌细胞的增殖、迁移和侵袭;PRMT1可能通过TGF-β/smad通路促进肝癌细胞的上皮间质转化。这为肝癌细胞上皮间质转化的分子机制提供了一定的依据,并提示PRMT1可能成为肝癌患者新的靶向治疗或药理学位点。