芙朴感冒颗粒活性成分的液质联用分析及其抗炎活性评价

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中药及复方成分复杂,种类繁多,除了研究较多的常量组分,还有大量尚未发现的微量和痕量组分。芙朴感冒颗粒是由木芙蓉叶、厚朴、陈皮、牛蒡子这四味中药经过适宜加工提取制成,临床上广泛用于治疗风热及风热挟湿感冒。但是,国内外学者对该制剂所含化学成分的研究较少,导致其药效物质基础研究较薄弱。为初步探索芙朴感冒颗粒的药效物质基础,本课题利用HPLC-IT-MSn液质联用仪,以芙朴感冒颗粒为研究对象,优化并建立芙朴感冒颗粒复方及三种溶剂提取的单味药材化学成分快速鉴定方法,对该制剂所含化学成分和主要成分的抗炎活性进行了研究。本文主要分为如下三个部分:1.芙朴感冒颗粒整体成分的定性研究。以芙朴感冒颗粒作为主要研究对象,采用HPLC-IT-MSn方法对其进行快速分离鉴定,结果共从芙朴感冒颗粒中检测到117个化合物,通过比较液相保留时间,结合质谱裂解数据、相关质谱裂解规律和文献数据,快速推测和鉴定了72个化合物,包括25个木脂素类化合物,23个黄酮类化合物,15个酚酸类化合物,4个生物碱类化合物和5个其它类化合物,并对每个化学成分进行了药材来源归属,较全面系统地分析了芙朴感冒颗粒中的化学成分,并对酚酸类、黄酮类、木脂素类和生物碱类化合物的质谱裂解规律进行了研究和总结,为该制剂后续各项研究的开展提供化学物质基础。2.单味中药不同提取方法成分比较。分别采用水煎煮、95%乙醇提取、乙酸乙酯提取三种方法分别对四种中药材进行提取,使用优化后的HPLC-IT-MSn方法进行分离鉴定。结果从木芙蓉叶中鉴定出30个化合物,其中8个为首次从该植物中测得;从厚朴中鉴定出38个化合物,其中7个为首次从该植物中测得;从陈皮中鉴定出75个化合物,其中11个为首次从该植物中测得;从牛蒡子中鉴定出55个化合物,其中9个为首次从该植物中测得。3.芙朴感冒颗粒主要单体及复方的抗炎活性研究。以LPS诱导的RAW264.7小鼠巨噬细胞为炎症模型,采用MTT法确定药物浓度对细胞活性的影响,从而确定给药浓度范围。细胞培养液中分别添加不同浓度各样品,然后再添加LPS刺激,采用Griess法检测各组药物对LPS刺激的RAW264.7细胞NO分泌的影响。
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