【摘 要】
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目的:1.建立用于治疗重症急性胰腺炎（Severe acute pancreatitis,SAP）的持续性区域动脉灌注大鼠模型。2.探讨5-氟尿嘧啶（5-Fluorouracil,5-FU）诱导胰腺腺泡细胞凋亡对SAP的治疗效果。3.探讨5-FU诱导胰腺腺泡细胞凋亡治疗SAP的机制。方法:1.建模:选取8周龄清洁健康SD大鼠24只,体重（280±50）g,腹腔内注射水合氯醛将其麻醉,将5%牛磺胆酸
【基金项目】
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湖南省自然科学基金（2018JJ3292）研究项目
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目的:1.建立用于治疗重症急性胰腺炎（Severe acute pancreatitis,SAP）的持续性区域动脉灌注大鼠模型。2.探讨5-氟尿嘧啶（5-Fluorouracil,5-FU）诱导胰腺腺泡细胞凋亡对SAP的治疗效果。3.探讨5-FU诱导胰腺腺泡细胞凋亡治疗SAP的机制。方法:1.建模:选取8周龄清洁健康SD大鼠24只,体重（280±50）g,腹腔内注射水合氯醛将其麻醉,将5%牛磺胆酸钠逆行泵入胰胆管建立SAP模型,并同时行胃左动脉置管。2.分组:造模成功后大鼠随机编为1-24号,1-8号为SAP+胃左动脉腹腔干泵注生理盐水（Group A）、9-14号为SAP+尾静脉泵注5-FU治疗组（Group B）、15-24号为SAP+胃左动脉腹腔干泵注5-FU治疗组（Group C）。3.给药:A组在建模成功后6h给经动脉导管泵入生理盐水（40mg/kg）,速度为6ml/h;B组经尾静脉泵入5-FU（40 mg/kg）治疗,速度为6ml/h;C组经动脉导管泵入5-FU（40 mg/kg）治疗,速度为6ml/h。4.检测:给药6 h后处死SD大鼠并采集腹腔动脉血液和胰腺标本。ELISA法检测血清中淀粉酶（AMS）、脂肪酶（LPS）及炎性细胞因子（IL-1、IL-6、TNF-α）;胰腺组织HE染色行病理检测;Tunel法检测大鼠胰腺腺泡细胞的凋亡情况;Western blot检测胰腺凋亡通路上p53、Bax、Bcl-2蛋白的表达情况。结果:1.成功的建立了一个重复性好、选择性强、对血流动力学影响较小的持续性区域动脉灌注的大鼠模型。2.三组大鼠存活情况相比较（P>0.05）无统计学意义。3.ELISA法检测结果显示,B、C组较A组血清AMS、LPS的浓度显著降低（P<0.05）;炎性细胞因子（IL-1、IL-6、TNF-α）含量降低（P<0.05）;且C组与B组相比,以上指标均有明显降低（P<0.05）。4.HE染色行组织病理学检测结果显示,与A组相比,B、C组病理改变减轻;且C组较B组也有所减轻。5.Tunel法检测胰腺腺泡细胞凋亡率结果提示,B组与A组相比较,无统计学意义（P=0.08）;C组与A组相比,细胞凋亡率明显增加（P<0.05）;C组与B组相比,细胞凋亡率明显增加（P<0.05）。6.Western blot检测结果发现,与A组相比,B、C组中胰腺腺泡细胞凋亡调节蛋白P53表达水平升高,促凋亡蛋白Bax表达水平升高,抗凋亡蛋白Bcl-2表达水平降低,差异有统计学意义（P<0.05）;且C组较B组上述表达更为显著（P<0.05）。结论:1.5-FU能诱导SAP胰腺腺泡细胞的凋亡,抑制局部及全身炎症反应,对SAP治疗有效,而区域动脉灌注能选择性诱导胰腺腺泡细胞凋亡,达到加强治疗的目的。2.Bcl-2家族在5-FU诱导SAP胰腺腺泡细胞凋亡的过程中可能起了重要作用。
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