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目的通过制作新生大鼠缺氧缺血性脑损伤（HIBD）模型，观察HIBD后不同时间点海马区Tau蛋白、磷酸化Tau（p-tau）蛋白和凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax及神经细胞凋亡的表达情况，研究其相关性，探讨Tau蛋白和p-tau蛋白与HIBD后脑细胞凋亡的关系，以期为HIBD发病机制的分析和临床干预提供一定的指导。方法新生7日龄清洁级SD大鼠56只，随机分为正常对照组8只、假手术组8只和HIBD组（按处死时间点分为3、6、12、24、48h5个亚组）40只。每个亚组各8只动物。HIBD组参照Rice法建立HIBD动物模型，观察造模前后动物行为学改变，在不同时间点断头取脑。假手术组仅暴露左颈总动脉，不结扎，不缺氧，手术结束立即断头取脑。正常对照组未进行手术及缺氧处理，与假手术组同时间处死取脑。脑组织经常规固定、石蜡包埋、切片，采用苏木精—伊红（HE）染色观察海马区形态结构改变，免疫组化染色检测Tau蛋白、p-tau蛋白、Bcl-2、Bax的表达，原位切口末端标记法（TUNEL）检测神经细胞凋亡。数据以x s表示，SPSS17.0统计软件进行分析，多组间比较时，符合正态分布、方差齐性，采用单因素方差分析，组间差异有统计学意义者用最小显著差（LDS）法进行两两比较；非正态分布、方差不齐时则用秩和检验；Tau蛋白、p-tau蛋白与Bcl-2、Bax,凋亡细胞表达的相关性分析采用Pearson或Spearson相关分析法,以α=0.05为检验水准。结果1动物模型的鉴定：HIBD组新生大鼠缺血缺氧后出现不同程度的行为异常,如头颤、肢体抖动、站立不稳、翻身困难、夹尾左旋、甚至抽搐。HE染色不HIBD后海马区神经细胞出现肿胀、变性、坏死,核固缩、碎裂,细胞排列紊乱,神经元数目减少。2免疫组化结果：Tau蛋白、p-tau蛋白、Bcl-2、Bax阳性染色均呈棕黄色或深棕色颗粒沉积,着色部位位于神经元胞浆或突起,前两者阳性表达主要见于齿状回,后两者在海马区广泛表达。①Tau蛋白：正常对照组和假手术组可见少量Tau蛋白阳性细胞,HIBD后3h Tau蛋白表达增强,阳性细胞数增加,24h达高峰,之后稍降,但仍多于正常对照组和假手术组;②p-tau蛋白：正常对照组和假手术组可见少量p-tau蛋白阳性细胞,HIBD后3h阳性细胞开始增多,逐渐增加,12h达高峰,之后渐降,HIBD后48h p-tau蛋白表达水平与正常对照组和假手术组基本相同;③Bcl-2：正常对照组和假手术组未见明显Bcl-2阳性细胞,HIBD后3h Bcl-2表达增强,阳性细胞数增加,24h达高峰,之后渐降,但仍多于正常对照组和假手术组;④Bax:Bax在正常对照组和假手术组的表达水平较低,HIBD后3h表达开始增强,至48h达高峰,HIBD组各时间点阳性细胞数均多于正常对照组和假手术组。3TUNEL检测凋亡细胞：凋亡阳性细胞在正常对照组和假手术组表达极少,HIBD后3h可见凋亡阳性细胞数增加,24h达高峰,之后渐降,但仍多于正常对照组和假手术组。4Tau蛋白、p-tau蛋白、Bcl-2、Bax和凋亡细胞表达的相关性分析：新生大鼠海马区,Tau蛋白阳性细胞数与Bcl-2、Bax和凋亡阳性细胞数皆呈正相关(r1=0.819,P<0.01;r2=0.928,P<0.01;r3=0.01),即在一定时间内(HIBD24h内)随Tau蛋白阳性细胞的增加,Bcl-2、Bax和凋亡阳性细胞均逐渐增多;p-tau蛋白阳性细胞数与Bcl-2阳性细胞数呈正相关(r1’=0.337,P<0.05),与Bax、凋亡阳性细胞数呈负相关(r2’=-0.380,P<0.05;r3’=-0.294,P<0.05),即在一定时间内(HIBD12h内)随p-tau蛋白阳性细胞的增加,Bcl-2阳性细胞逐渐增多,而Bax、凋亡阳性细胞则逐渐减少。结论1正常新生大鼠海马Tau蛋白、p-tau蛋白有一定量的表达，在HIBD后二者表达发生动态改变，且与神经细胞凋亡相关，说明二者参与了HIBD后的神经细胞凋亡。2新生大鼠HIBD后海马Tau蛋白表达与凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax及凋亡阳性细胞表达均呈正相关，p-tau蛋白表达与Bcl-2表达呈正相关、与Bax和凋亡阳性细胞表达呈负相关，说明Tau蛋白的过度表达是HIBD后细胞凋亡的结果，而HIBD后p-tau蛋白短暂性增多可能使细胞逃逸凋亡。