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睾丸和附睾是雄性生殖系统重要的组成部分。精子从睾丸产生，其经过附睾，才能获得运动和授精能力。本研究中，我们分两部分展开研究。在第一章中，分别构建了Lcn5-Cre和Lcn5-CreERT2两种转基因小鼠，其中CreERT2需受他莫昔芬药物诱导入核才能发挥作用。检测Cre和CreERT2时空表达谱，发现两者均特异在附睾头部表达，其mRNA从第30天开始转录，并随附睾发育而表达上调。接着，将Lcn5-Cre和Lcn5-CreERT2转基因小鼠分别与Cre报告基因小鼠mT/mG交配，检测子代双转基因小鼠不同组织或器官中绿色荧光蛋白表达。发现Cre和CreERT2重组酶两者均在附睾头部中远端特异表达。随后的免疫荧光实验证实，Cre重组酶定位于附睾主细胞。将Lcn5-Cre转基因小鼠与“floxed”化的Aip1小鼠交配，建立了Aip1附睾头部特异剔除小鼠模型。总之，我们成功构建了附睾头部中远端主细胞特异表达的Cre和CreERT2转基因小鼠模型，这为利用条件性基因剔除策略开展功能研究奠定了基础。 在第二部分，我们揭示了miR-34a在精子发生中的作用。构建了白消安药物诱导的生精障碍模型，检测发现miR-34a表达上调。接着我们构建了miR-34aLSL-Tetoff转基因小鼠，并与Mvh-Cre(Ddx-Cre)转基因小鼠交配，建立了生精细胞过表达miR-34a的转基因小鼠模型。表型分析发现，过表达miR-34a后小鼠睾丸变小，精子发生出现障碍，附睾中无精子。进一步检测，我们发现精原干细胞自我更新未受影响，然而，减数分裂粗线期细胞数量锐减，未见双线期细胞，提示减数分裂发生停滞。为了深入研究过表达miR-34a后导致生精障碍的分子机制，我们计划通过芯片筛选和miRNA靶基因软件预测的方法，寻找miR-34a直接作用的靶基因。另外，成功构建的条件性过表达miRNA转基因载体，可应用于制备其它感兴趣miRNA转基因过表达动物模型。