论文部分内容阅读
背景肺涎腺型癌是一组相对罕见的肺恶性肿瘤,主要包括腺样囊性癌和粘液表皮样癌等,目前相关研究较少,特别是分子病理方面。本研究主要针对肺腺样囊性癌(Pulmonary adenoid cystic carcinoma, PACC)及肺粘液表皮样癌(Pulmonary mucoepidermoid carcinoma,PMEC)进行组织病理及分子病理研究。材料与方法课题研究分两部分：第一部分对我院2000-2014年间27例PACC病例行IHC染色和ISH检测,分析其临床病理特征及HPV感染状况,并比较34例ACC及55例其它涎腺肿瘤中MYB IHC表达情况,分析MYB在确诊ACC中的价值。应用FISH方法检测MYB基因拷贝数改变情况,并分析MYB与PACC预后的关系。10例DNA扩增成功的病例通过Sange r测序、NGS和QPCR三种方法检测EGFR、KRAS、BRAF、 ALK、PIK3CA、PDGFRA和DDR27个基因16个外显子突变情况。第二部分是对我院2000年-2014年期间26例PMEC及8例具有类似粘液表皮样癌结构的肺癌病例进行IHC染色,分析其临床病理特征及诊断和鉴别诊断要点。通过FISH方法检测MAML2基因重排情况及ALK IHC阳性病例的ALK基因重排情况,并分析MAML2重排与PMEC预后的关系；9例DNA扩增成功的病例通过Sanger测序、NGS和QPCR三种方法检测上述7个基因16个外显子突变情况。结果第一部分：2014年之前的24例PACC进行了临床病理研究,21例为原发性,平均年龄49岁,男女比例6：15,病变均位于气管或支气管；其中11例进行部分气道切除手术,10例切缘阳性,10例可见神经侵犯。免疫组化BCL-2、Collagen Ⅳ、CD117、CK7、P16、P63和SMA全部阳性(100%,23/23)；P53和TTF-1全部阴性(0/23)。15例原发性PACC随访了4-120个月(中位随访44.8个月),中位无复发生存期为56.9个月,5年无复发生存率为48.6%,术后放疗是预后好的因素(P<0.05)。3例为转移性,病变均位于肺实质内。补充2014年3例新发病例后进行MYB的IHC研究,MYB在19例PACC和9例头颈部ACC(82.35%,28/34)中阳性表达,在5例对照组肿瘤(9.09%,5/55)中阳性表达,差异有统计学意义(P<0.001)。无复发和转移组病例MYB阳性表达率(66.67%,8/12)低于有复发或转移组病例(100%,8/8),原发性PACC病例组MYB阳性表达率(76.2%,16/21)低于转移性PACC病例组(100%,3/3),结果未达到统计学意义。FISH检测发现2例PACC出现了MYB拷贝数增加,均为复发或转移组病例。P16阳性表达细胞数超过40%的11例病例加作了HPV ISH检测,均未发现阳性信号(0%,0/11)。10例扩增成功的PACC病例,三种方法均未检测到7个基因中16个外显子突变(0/10)。第二部分：重新阅片后排除了8例原诊断为PMEC的病例后,26例PMEC病例入组,平均年龄46.5岁,男女比例1：1。18例为低级别PMEC,8例为高级别PMEC。显微镜下19例为气道内生长,4例为气道周围生长并侵及肺实质。26例均未见角化现象,肿瘤间质均见不同程度的玻璃样变性,11例伴有钙化。免疫组化CK7、MUC5AC和P63全部阳性(100%,26/26)；EGFR 11例阳性(11/26)：TTF-1、Calponin、HER2和ALK全部病例均为阴性(0/26)。FISH检测12例PMEC发现MAML2基因重排(66.7%,12/18)。23例患者随访了7-170个月(中位随访32.6个月),5年和10年生存率为72.1%,与预后不良相关因素包括：年龄350岁,气管周围生长型,肿瘤直径≥3cm,高级别肿瘤,Ki-67指数≥10%。手术完全切除是预后好的因素。9例DNA扩增成功的PMEC三种方法均未检测到7个基因中16个外显子突变(0/9)。8例排除入组的病例均有类似粘液表皮样癌的结构,免疫组化CK7、MUC5AC、P63和TTF-1均阳性(8/8),5例ALK阳性表达(5/8,62.5%),FISH检测5例均发现ALK基因重排。结论(1)PACC主要位于气道,易于侵犯神经且手术难于切除干净,手术切除及术后放疗有助于疾病治疗减少复发。(2)MYB蛋白在大多数PACC中阳性表达,其阳性表达可能与预后无关。MYB蛋白表达在ACC中有诊断及鉴别诊断价值,可以通过MYB免疫组化的方法帮助诊断,此外在少数ACC病例中发现有MYB基因扩增,不是导致MYB蛋白阳性表达的主要因素。(3)HPV感染可能不是PACC中P16蛋白阳性表达的原因。(4)位于气道、出现粘液成分、缺乏角化及免疫组化P63、MUC5AC阳性和TTF-1阴性有助于诊断PMEC。主要需要鉴别诊断的疾病为具有类似粘液表皮样癌结构的肺癌,其本质可能为具有粘液成分的腺鳞癌或腺癌,因ALK基因重排率高,建议在诊断工作中引起重视。(5)大多数PMEC中出现MAML2基因重排,MAML2基因重排可能与预后无关。PMEC中未检测到HER2和ALK表达。(6)PMEC中提示预后不良的因素包括：年龄≥50岁、气道周围生长方式、肿瘤最大径≥3cm、高级别肿瘤及Ki-67增殖指数≥10%。完全手术切除是预后良好的因素。(7)EGFR、KRAS、BRAF、 ALK、PIK3CA、PDGFRA和DDR2基因可能不是两种主要肺涎腺型癌的驱动基因。