蛹虫草培养关键技术研究

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蛹虫草(Cordyceps militaris)是一种珍贵的食、药用真菌,不仅营养丰富,还具有降血压、降血糖、抗疲劳、抗肿瘤及增强人体免疫力等功效,是理想的保健食品。因此,探究蛹虫草的栽培关键技术,对蛹虫草的开发和利用具有重要意义。本文研究内容涉及蛹虫草栽培基质、主要环境因子、基本工艺参数优化及蛹虫草栽培中几种病原菌分离与鉴定。主要研究结果如下:1.通过测定不同营养条件下蛹虫草子座鲜质量、子座密度、子座长度、生物学效率及基质利用率等指标,建立不同营养条件与其各指标之间的数学模型,研究了不同碳源、氮源、无机盐、柠檬酸铁铵和三十烷醇对蛹虫草生长发育的影响规律。结果表明:蛹虫草能以单糖、双糖、多糖等作为碳源,以蔗糖为碳源时,蛹虫草生长最好,其最佳浓度为7.2g/L;蛹虫草对氮源的利用较广,其中以牛奶为最优氮源,其最佳浓度为43.9mL/L;在供试无机盐中,氯化钾对蛹虫草的促进作用最好,其最佳浓度为6.1g/L;此外,适量的柠檬酸铁铵和三十烷醇也有利于蛹虫草的生长发育,其最适浓度分别为0.4g/L和1.0mg/L。2.通过建立数学模型,研究了温度对蛹虫草菌丝生长速率以及基质初始pH对蛹虫草生长发育的影响规律。结果表明:蛹虫草在18℃~28℃内均可生长,当温度为23.7℃时,菌丝生长速率最大,为4.1mm/d;培养基过酸或过碱都不利于蛹虫草生长发育,当基质初始pH为7.4时,蛹虫草生长发育过程中的各项指标均达到最佳。3.研究了基质用量、基质料水比、接种量对蛹虫草生长发育的影响以及子座培养时间对其虫草素含量的影响,并采用二次正交旋转设计方法研究了基质用量和基质料水比对蛹虫草子座鲜质量的影响规律。结果表明:基质用量为350g/盒,基质料水比为1:1.5,接种量为74mL/盒时,蛹虫草子座密度最大,生产周期最短,基质利用率最高,产量最高;此外,随着子座培养时间的延长,其虫草素含量在子座生长后期增加较快。4.利用16S rDNA和ITS序列分析的方法,结合细菌和真菌形态特征及细菌生理生化鉴定,研究了蛹虫草栽培过程中易导致病害的3种细菌和3种真菌。结果表明,病原菌株X1与Flavobacterium chungangense,X2与Flavobacterium chungangense,X3与Janthinobacterium lividum,Y1与Fungal sp. YX-2,Y2与Calcarisporium sp. LB2012-1,Y3与Gibberella intermedia AB92的进化距离较小,同源性较高,初步确定分别与其同种。这对蛹虫草常见病害的防治研究具有重要的指导意义。
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