拟南芥SYP71/72/73在膜泡运输和植物生长发育过程的功能分析

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膜泡运输主要包括运输囊泡的出芽、定向移动、拴留和膜融合等四个过程。这些过程受到许多因子的调控,如coat、SM、tether、SNARE和Rab蛋白等。其中,SNARE因子在膜融合过程中发挥着重要功能,它们形成SNARE复合体从而介导膜融合过程。通过生物信息学的预测,在拟南芥中,存在酵母Usel的同源蛋白AtUsel,它可能与AtUfel(SYP81)、AtSec20等组成SNARE复合体,在高尔基体和内质网间的膜泡运输过程中发挥作用。本研究对AtUsel候补基因SYP7家族的SYP71/72/73在拟南芥中功能进行了深入分析。我们通过qPCR和Western blot检测了 SYP71/72/73在拟南芥各组织中的表达水平,并通过Northern blot检测了syp 71-1、过表达植株p35S::myc-SYP71和SYP7RNAi转基因植株中SYP71的mRNA表达水平。我们还通过瞬时表达确定了 SYP72和SYP73在拟南芥悬浮细胞中的内质网有定位。同时,对syp71-1、syp 72-1、syp 72-2、syp 73-1和syp73-2 单突变体,p35S::myc-SYP71、p35S::myc-SYP72、p35S::myc-SYP73 和SYP7RNAi转基因植株进行了表型观察。结果表明,当SYP71表达下调时,影响植物体的生长发育初期根的发育,当SYP72表达下调时,对生长发育初期根的发育有一定的促进作用。我们还通过pull down分析检测出SYP71/72/73与AtUfel在植物细胞内的相互作用关系。以上结果表明,在拟南芥植物细胞中,Qc-SNARE SYP71能够与Qa-SNARE AtUfel相互作用,对内质网和高尔基体之间的膜泡运输以及植物生长起调控作用
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