金佛手挥发性成分及精油生物活性研究

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本论文研究内容共有四个部分,分别是利用超声波辅助-水蒸气蒸馏法(UAHD)和超临界CO2萃取法(SFE-CO2)提取佛手精油,用气相色谱-质谱联用(GC-MS)法分析精油成分;利用顶空固相微萃取法(HS-SPME)和GC-MS法提取和分析佛手自然香气成分,并与精油化学成分进行比较;通过对亚铁离子还原能力(FRAP)、ABTS-自由基清除能力和超氧自由基(O2-·)清除能力的测定综合评价佛手精油抗氧化活性;通过对最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC/MFC)的测定综合评价佛手精油抑菌活性。主要结论如下:采用单因素及响应面分析法得到UAHD法提取佛手精油的最优工艺条件:超声时间为60min,蒸馏时间为4h,料液比为1:9.5,此条件下精油得率为0.57%,有效的提高了精油的得率。采用SFE-CO2法和UAHD法提取佛手精油,通过GC-MS法对两种提取方法得到的佛手精油进行化学成分分析。UAHD法提取的精油主要成分以萜烯类为主,主要化学成分为D-柠檬烯(60.44%)和γ-松油烯(20.28%);SFE-C02法萃取的精油主要成分以酸类为主,主要化学成分为亚油酸(65.61%)、棕桐酸(12.56%)和柠檬油素(10.52%)。在化学成分和相对含量上,两种提取方法所得的佛手精油均存在明显的差别。利用HS-SPME法萃取佛手自然香气成分,共检出41种化合物,其中D-柠檬烯(34.81%)、β-石竹烯(9.91%)、α-香柑油烯(8.33%)、γ-松油烯(5.54%)、α-松油醇(5.53)、β-红没药烯(5.51%)、β-荜澄茄油烯(2.82%)、甘香烯(2.27%)和间伞花烃(2.51%)为主要成分。与佛手精油化学成分相比,HS-SPME法提取的香气成分比精油化学成分复杂,但主要香气成分与精油化学成分基本一致。另外,研究发现佛手香气的总体特征以果香和木香为主,UAHD法提取得到的佛手精油保留了佛手良好的香气特征。本文选取UAHD法提取的佛手精油进行抗氧化和抑菌实验。采用FRAP、ABTS-自由基清除能力、超氧自由基(C2-·)清除能力的测定综合评价佛手精油抗氧化活性,均表现出一定的抗氧化活性。佛手精油的ABTS-自由基清除能力较强,其次为FRAP和超氧自由基(O2-·)清除能力。本文以大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、藤黄微球菌和酵母菌为供试菌,通过测定MIC和MBC/MFC值,得出佛手精油对微生物的抑菌活性表现为:大肠杆菌>金黄色葡萄球菌=酵母菌>藤黄微球菌=枯草芽孢杆菌。通过不同浓度佛手精油对5种供试菌抑菌活性的研究得出,佛手精油对5种供试菌的抑菌活性都是随着精油浓度的升高而增大,不同菌种增大的速率不同,在较高浓度下均能达到完全抑制菌种生长的效果,在较低浓度下对大肠杆菌的抑菌效果最为明显,然后依次是藤黄微球菌、金黄色葡萄球菌、酵母菌、枯草芽孢杆菌。
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