MCM2、Connexin-32、Cap43在结直肠腺瘤中的表达

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目的:近年来,随着人们生活水平的提高以及饮食习惯的改变,大肠癌的发病率及死亡率呈不断上升的趋势,严重影响着人们的健康和生命。结直肠癌的发展过程为炎症性增生、腺瘤改变、癌变和转移,其分子机制涉及致癌基因的活化和抑癌基因的失活。微小染色体维持蛋白2(Minichromosome maintenance proteins2,MCM2)是真核细胞DNA复制前复合体的必需组成成分,只存在于细胞核中,MCM2及mRNA在增殖细胞中表达水平高,在静止期细胞或分化好的细胞不表达或表达水平很低。MCM2可作为肿瘤细胞的特异性标志,被认为是癌前标记物。Cap43(calcium channel activated protein43)基因,又称N-myc下游调节基因NDRGl(N-myc downstream regulated gene1,NDRG1),是在研究镍化合物致癌机制过程中,采用差异显示技术从人的支气管肺泡上皮细胞A549中分离得到的一种新的基因。研究表明,该基因激活并表达Cap43蛋白为结肠癌、前列腺癌和乳腺癌发生、发展的早期事件,提示Cap43基因是肿瘤发生的早期启动基因。细胞间隙连接蛋白(connexin,Cx)是存在于细胞之间的负责物质及信息交换的通道蛋白,对细胞增殖、分化及机体的生长发育至关重要。近年来研究发现,Cx功能复杂多样,在许多生理及病理过程中都有参与,更具意义的是,它与阻止肿瘤的发生发展密切相关,被誉为“第二类抑癌基因”。本实验旨在检测微小染色体维持蛋白2(MCM2)、钙通道激活蛋白43(Cap43)、连接蛋白32(Connexin-32)在正常结直肠粘膜、不同病理类型的结直肠腺瘤和结直肠癌组织中的表达,探讨它们在预示结直肠腺瘤恶变的作用,并期望为早期肿瘤的基因治疗提供新的治疗靶点。方法:①实验材料:收集2011年1月-2011年12月解放军252医院普外科手术切除的结直肠癌标本共60例及癌旁正常组织60例,解放军252医院消化内镜中心各型结直肠腺瘤切除术后标本共80例(包括管状腺瘤40例,绒毛状腺瘤20例,混合性腺瘤20例),所有标本均经组织学检查确诊。②检测指标:HE染色观察结直肠腺瘤、结直肠癌以及正常结直肠粘膜的显微镜下形态学变化,用以区分结直肠腺瘤的病理类型和组织分化程度。利用免疫组化方法检测MCM2、Cap43、Connnexin-32的组织定位及表达情况。③数据统计与分析:检测值以采用SPSS17.0统计软件进行卡方检验,P<0.05为差异有统计学意义。结果:①MCM2在正常肠粘膜组、结直肠腺瘤组、结直肠癌组中表达之间均有显著性差异,P<0.05,阳性表达率分别为16.7%、55.0%、80.0%;在管状腺瘤、混合性腺瘤、绒毛状腺瘤中表达亦有统计学差异,P<0.05,阳性表达率分别为40.0%、65.0%、75.0%。②Connexin-32在正常肠粘膜组、结直肠腺瘤组、结直肠癌组中表达之间均有显著性差异,P<0.05,阳性表达率分别为66.7%、36.2%、5.0%;在管状腺瘤、混合性腺瘤、绒毛状腺瘤中阳性表达率分别为47.5%、35.00%、15.00%。统计学分析有统计学差异,P<0.05。③Cap43在正常肠粘膜组、结直肠腺瘤组、结直肠癌组中表达之间均有显著性差异,P<0.05,其阳性表达率分别为31.7%、63.8%、91.7%;而在管状腺瘤、混合性腺瘤、绒毛状腺瘤中亦明显增高,其阳性表达率分别为52.5%、60.0%、90.0%,差异有统计学意义,P<0.05。结论: MCM2、Connexin32、Cap43与结直肠腺瘤的恶变及结直肠癌的发生相关;检测细胞增殖标记物MCM2、连接蛋白32、钙通道激活蛋白43的表达可评估结直肠腺瘤的进展和结直肠癌的发生,可能成为预测结直肠腺瘤恶变的分子生物学指标。
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