绿茶和普洱茶提取物对巨噬细胞ABCA1和ABCG1表达的比较研究

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目的:比较绿茶和普洱茶提取物对巨噬细胞的三磷酸腺苷结合盒转运蛋白A1(ATP binding cassette transporter A1, ABCA1)和三磷酸腺苷结合盒转运蛋白G1(ATP binding cassette transporter G1, ABCG1)的表达影响,并探讨两种茶对胆固醇代谢的影响。方法:1.THP-1细胞用160nmol/L佛波酯诱导成为巨噬细胞;2.MTT法明确绿茶与普洱茶提取物作用于细胞的最佳浓度;3.用最佳浓度的绿茶和普洱茶提取物分别与50μg/mL ox-LDL共培养巨噬细胞48h,油红O染色观察各组泡沫细胞生成情况;4.巨噬细胞与50μg/mL的ox-LDL孵育48h制备泡沫细胞模型。绿茶和普洱茶提取物分别与泡沫细胞共培养,24h和48h各提取一次细胞总RNA和蛋白质;5. Real-timePCR和Western blot检测各组细胞中ABCA1和ABCG1的mRNA和蛋白质的表达情况影响。结果:1. Ox-LDL孵育巨噬细胞48h后,油红O染色观察可见细胞内脂质积累,形成大量泡沫细胞。绿茶和普洱茶提取物与ox-LDL共孵育巨噬细胞后,细胞内脂质有所减少,泡沫细胞生成量较泡沫细胞对照组显著降低(P<0.05),其中绿茶组泡沫细胞生成量比普洱茶组少(P<0.05)。2.细胞处理24h后,泡沫细胞对照组、绿茶组和普洱茶组的ABCA1和ABCG1的mRNA及蛋白质的表达均较空白对照组升高(P<0.01),绿茶组的ABCA1和ABCG1的表达较泡沫细胞对照组差异不显著,普洱茶组的ABCA1表达较泡沫细胞对照组无显著差异,而ABCG1的表达较泡沫细胞对照组有显著差异(P<0.01);两种茶之间的ABCA1的表达差异不显著,但普洱茶组ABCG1的表达显著高于绿茶组(P<0.05);3.细胞处理48h后,泡沫细胞组的ABCA1和ABCG1的mRNA和蛋白质表达与空白对照组无显著差异,绿茶和普洱茶组的ABCA1和ABCG1表达较空白对照组和泡沫细胞组有显著差异(P<0.01),两种茶之间的ABCA1表达差异不显著,ABCG1表达普洱茶较绿茶组高(P<0.05)。结论:1.50μg/ml的ox-LDL处理巨噬细胞48h会造成泡沫细胞大量生成;2.绿茶与普洱茶提取物能显著抑制巨噬细胞源性泡沫细胞的生成,且绿茶的抑制作用优于普洱茶;3.绿茶与普洱茶提取物能增加泡沫细胞中ABCA1和ABCG1的mRNA和蛋白质表达,普洱茶对ABCG1的mRNA和蛋白质表达的促进作用优于绿茶,推测两种茶提取物可能通过增加ABCA1和ABCG1的表达促进胆固醇逆转运。
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