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结肠癌作为多发的恶性肿瘤受到了广泛关注,目前的结肠癌治疗主要应用副作用较大的化疗药物。桦木酸（BA）是一种提取自药用植物的的天然化合物,对结肠癌有明显的抑制效果,然而其较差的水溶性阻碍了它的临床应用。将BA包载于现代纳米载药系统中,有利于提高它的溶解度和生物利用度。借助负载系统的特定性能,有望实现BA在结肠部位的靶向释放。本文利用现代纳米载药技术制备了具有pH靶向性能的BA纳米脂质体,并通过体外细胞和蛋白水平、小鼠体内器官和组织药效学的验证,研究了BA和BA纳米制剂的抗结肠癌作用的机制及药效差异。具体研究内容与结果如下:（1）本文首先建立了基于HPLC准确检测BA含量的方法,并进行一系列方法学考察证明了此方法的准确与可靠,方法线性范围为1500μg·mL-1,检测限为0.042μg·mL-1,定量限为0.18μg·mL-1。基于三种不同纳米剂型,本文对BA纳米制剂的类型进行了筛选比较,分别制备了包载BA的纳米粒（BA-NPS）、自微乳（BA-SMEDDS）和脂质体（BA-LP）并进行了比较,发现BA-LP的粒径最小,分布最均匀,包封率较高且释放更缓慢,故此选择脂质体作为后续研究的剂型。（2）采用薄膜分散法制备包载BA的脂质体BA-LP,通过添加Eudragit S100赋予脂质体pH靶向能力。通过单因素实验和正交实验优化处方条件,得到的最佳pH-BA-LP制备处方为:大豆卵磷脂固定为30 mg,45 oC水浴,BA、胆固醇、Eudragit S100和胆酸钠的用量分别为2、6、4和20 mg,IPM加入量为60μL。优化处方下制备的pH-BA-LP外观良好,平均粒径约为90 nm,PDI为0.182,Zeta电位值为-32±5.1 mV,包封率为90.66%。体外释放研究表明pH-BA-LP在pH 7.4介质中的累积释放量高于在pH 6.8和pH 1.2介质中,72 h时释放度达91.86%,远高于原料药的相应释放度,证明pH-BA-LP提高了BA在水体中的溶解能力并存在pH靶向释放效果。稳定性评价发现pH-BA-LP可在4 oC稳定存放超过15天,但60 oC下会迅速变质失去稳定性。通过冷冻干燥将pH-BA-LP制备成前体脂质体可有效增强其稳定性,优化的最佳冻干条件为:以2.5%的海藻糖为冻干保护剂,预冻时间为8 h。前体脂质体在25 oC可稳定保存30天以上,且制备成前体脂质体不会影响pH-BA-LP的pH靶向释放能力。（3）体外细胞实验结果显示,pH-BA-LP对五种结肠癌细胞SW620、HCT116、HT29、SW1116和CT26以及正常结肠细胞HCoEpiC的半数抑制浓度分别为56.11、43.23、59.49、56.63、66.35和89.11μM,表明pH-BA-LP对结肠癌细胞具有选择性,pH-BA-LP对各细胞的抑制效果均强于游离BA。划痕实验发现pH-BA-LP可有效降低结肠癌细胞的迁移速度。Western blot实验发现BA和pH-BA-LP对蛋白激酶Akt和p-Akt的表达均有显著抑制作用,且可剂量依赖性上调Raptor和VDAC1的表达。低浓度（25μM）的pH-BA-LP可上调TLR-4和TLR-9表达水平,但高浓度（50100μM）下TLR-4和TLR-9表达量迅速下降,对NFAT1与NFAT4蛋白的考察发现药物同样呈现先增强后抑制蛋白表达的结果。（4）动物实验证明pH-BA-LP可有效抑制小鼠体内的肿瘤生长,在高剂量（50mg/kg）下其抑瘤率达到了59.6%,高于同剂量下的游离BA（49.4%）。pH-BA-LP组小鼠心、肝、肺和肾脏器指数与空白对照组相比无显著差异,说明pH-BA-LP的生物安全性较高,而脾脏指数得增大可能是pH-BA-LP引发的免疫增强所致。HE染色与TUNEL染色实验发现pH-BA-LP给药组出现了程度高于游离BA的凋亡现象。通过流式细胞术对荷瘤小鼠瘤体、外周血和脾脏中免疫细胞的增殖和亚群变化进行检测,发现pH-BA-LP可升高各组织中NK细胞和CD3+细胞以及CD3中CD8的比例。这证明pH-BA-LP可通过增强荷瘤小鼠的自体免疫水平发挥抗癌作用。免疫组化发现pH-BA-LP组小鼠CD8和CD68阳性浸润率相比空白对照增加,CD163相对减少,证明了pH-BA-LP可调节荷瘤小鼠免疫系统。