论文部分内容阅读
目的:通过制作高脂血症、Ⅱ型糖尿病并发高脂血症、IgA肾病并发高脂血症大鼠模型,采用Realtime PCR(SYBR GreenⅠ)检测血管生成素样蛋白3(angiopoietin-related protein 3,ANGPTL3)和脂蛋白脂肪酶(Lipoprotein lipase,LPL)在脑、肺、心、肝、胃、肾、脂肪等7种组织中mRNA的表达水平,探讨Angptl 3组织表达特异性,分析Angptl 3、LPL在大鼠体内上述各组织表达水平与血脂水平、Ⅱ型糖尿病、IgA肾病的相关性,为进一步研究Angptl 3参与调节脂代谢的机制奠定基础。方法:以SD大鼠肝组织总RNA为模板,通过RT-PCR及T-A克隆,将GAPDH、Angptl3、LPL等基因片段装载到质粒上,并以此为模板绘制标准曲线。将40只健康雄性大鼠随机分为正常对照组(Normal Control,NC)、高脂血症组(Hyperlipidemia,HL)、Ⅱ型糖尿病组(Diabetes Mellitus,DM)、IgA肾病组(IgA Nephropathy,IN)等4组,10只/组。正常对照组给予普通饮食,其余三组给予高脂饮食以诱导高脂血症。DM组大鼠按30mg/kg单剂量腹腔注射STZ (Streptozotocin) ; IN组联合应用牛血清白蛋白(Bovine serum albumin,BSA)、蓖麻油、CCl4、脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)。饲养3个月后处死动物, Realtime PCR检测上述7种组织内GAPDH、Angptl3、LPL的mRNA表达水平。结果:三条标准曲线相关系数分别为:0.9976、0.9991、0.9996,反应效率分别为:0.9793、0.8623、0.8967,溶解曲线呈单一峰型。GAPDH在各组织均有稳定表达;Angptl3仅在肝、肾组织中表达,表达水平DM组>HL组>IN组>NC组。LPL主要在心、脂肪等组织表达,表达水平HL组>IN组>DM组>NC组。结论:在血脂水平不同、Ⅱ型糖尿病、IgA肾病等不同影响因素下,Angptl3仅在肝、肾组织表达,组织表达特异性并未改变。Angptl3的表达水平与血清胆固醇水平、胰岛素缺乏等存在密切联系,IgA肾病并未影响到Angptl3的表达水平。LPL表达水平与血脂水平、糖尿病状态等密切相关,Angptl3是否上调LPL的表达,尚需进一步研究。