不同方法建立造影剂致急性肾损伤大鼠模型的比较

来源 :福建医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:atta2002
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目的:本实验通过对比造影剂致急性肾损伤大鼠不同建模方法后肌酐水平升高程度、病理改变等情况,探索造影剂致急性肾损伤大鼠最佳建模方式。方法:将40只健康成年SD大鼠随机分5组:A组:空白对照组,正常饲养;B组:单纯造影剂组,正常饲养+泛影葡胺;C组:经典组,正常饲养+吲哚美辛+N-硝基-L-精氨酸甲酯基+泛影葡胺;D组:脱水组,禁水+呋塞米+泛影葡胺;E组:经典+脱水组,禁水+呋塞米+吲哚美辛+N-硝基-L-精氨酸甲酯基+泛影葡胺。5组SD大鼠均在第1天、第6天、第11天取眼眶静脉血2ml,第11天麻醉后取出大鼠双侧肾脏。血液标本测定大鼠血清肌酐(serum creatinine,SCr)和血清尿素氮(blood urea nitrogen,BUN),以评估大鼠肾脏功能变化。测定左侧肾脏组织中超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)抑制率和谷胱甘肽(Glutathione,GSH)水平,以评估炎症和氧化应激反应。右侧肾脏通过HE染色观察肾小管的病理形态学变化,通过TUNEL染色观察细胞凋亡情况,通过免疫组化方法测定caspase-3、caspase-9等凋亡相关蛋白在肾组织内的表达情况。结果:(1)建模成功率:经过Fisher确切概率法计算各组组间存在差异(P<0.05)。A组建模成功率0%,B组建模成功率12.5%,C组建模成功率25%,D组建模成功率75%,E组建模成功率100%。(2)SCr、BUN升高程度:E组注射造影剂后48h的SCr较基线平均升高153.10%,注射造影剂后7天的Scr较基线平均升高103.47%,48hSCr的升高幅度与A、B、C、D组存在统计学差异(1.52±0.29 vs 0.16±0.24;1.52±0.29 vs 0.32±0.16;1.52±0.29 vs0.44±0.94;1.52±0.29 vs 0.89±0.59;p均<0.05);E组注射造影剂后48h的BUN较基线平均升高342.09%,注射造影剂后7天的BUN较基线平均升高77.34%,48h BUN的升高幅度与A、B、C、D组存在统计学差异(3.21±1.73 vs 0.12±0.03;3.21±1.73 vs0.02±0.17;3.21±1.73 vs 1.04±2.15;3.21±1.73 vs 1.06±0.68;p均<0.05)。(3)肾小管的病理改变:形态学上,E组肾小管损伤评分与A、B、C、D组均存在统计学差异(2.21±0.3 vs 0.09±0.12;2.21±0.3 vs 0.2±0.24;2.21±0.3 vs 1.63±0.54;2.21±0.3 vs 0.96±0.61;P均<0.05)。细胞凋亡上,E组可见肾小管细胞大量凋亡,凋亡指数与A、B、C、D组均存在统计学差异(23.81±4.71 vs 1.37±1.26;23.81±4.71 vs 2.21±1.13;23.81±4.71 vs 15.19±2.28;23.81±4.71 vs 10.32±1.65;P均<0.05)。caspase-3蛋白表达上,E组棕黄色颗粒细胞最多,与A、B、C、D组存在统计学差异(15.83±1.11 vs 2.48±0.84;15.83±1.11 vs 4.02±0.92;15.83±1.11 vs 11.68±1.87;15.83±1.11 vs 7.86±1.13;P均<0.05)。caspase-9蛋白表达上,E组棕黄色颗粒细胞亦最多,与A、B、C、D组存在统计学差异(14.38±1.28 vs 2.91±0.95;14.38±1.28 vs3.77±0.96;14.38±1.28 vs 12.12±2.5;14.38±1.28 vs 7.91±1.17;P均<0.05)。结论:经典+脱水模型组(E组)建模成功率最高、肌酐和尿素氮升高幅度最大、病理改变最显著,且肾组织氧化应激指标改变明显,是最佳的造影剂致急性肾损伤大鼠模型。
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