近年来食品安全问题受到有关部门和消费者极大关注，微生物污染是食品安全的主要问题。而乳及乳制品营养丰富，备受人们青睐，同时也是微生物的良好培养基。一旦被微生物污染，在适宜条件下，微生物就会迅速繁殖引起乳及其产品腐败变质失去食用价值，甚至引起食物中毒或其他传染病的传播。根据调查，乳品安全事件中相当一部分是由于乳中致病菌污染所引起，而金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、产气荚膜梭菌是引起疾病的主要致病菌。大肠杆菌分布广，在各种动物及食品中较容易检测到，正常情况下不引起疾病，而一些特殊血清的大肠杆菌对人和动物有严重的威胁。目前对乳品安全的研究集中在安全危害分析和控制、奶源等，而乳制品从原料到生产加工、运输及储存过程，所接触的加工设备和材料，都可能使乳品中微生物含量高，同时乳制品加工操作环节比如杀菌、浓缩、喷雾干燥及包装等受到污染也会影响产品。因此调查研究乳品企业种微生物可能的污染来源，有利于企业制定合适的政策及采取相应措施，来控制乳及其制品的质量安全。大肠杆菌对生长环境要求不高，在食品生产中污染的机率高，可能存在于生产的各个环节，同时也被认为是粪便污染食品的指示菌，常用作食物、饮水或药物的卫生质量检验的标准。所以本研究选取大肠杆菌作为乳品企业生产中的调查对象，对其在企业中的污染情况进行深入研究。本研究样品来自西安及杨凌周边3个乳品企业整个生产环节中乳及其所接触的生产设备和环境，共采集534份样品。通过对样品进行大肠杆菌分离鉴定，研究大肠杆菌在不同样本中的分布；选取大肠杆菌阳性菌株检测血清型，以PCR技术检测其常见的毒力基因（stx，eae，ipa，elt，est，aggR）；采用琼脂稀释法测定大肠杆菌对常用抗菌药物的药敏特性；最后用PFGE技术对以上大肠杆菌进行聚类分析，为乳品加工厂中大肠杆菌污染情况、特性及追踪溯源提供依据。本试验主要取得以下结果：1.采集的534份样品共检出阳性样品32份，获得阳性菌株53株，总污染率为5.99%。其中A厂所检测样品均未被大肠杆菌污染，B厂污染率是10.71%，C厂污染率是5.61%。污染厂区不同采样场所中原料奶的污染率最高，其次是包装车间通风口、工厂管道内水、包装处操作台和生产车间旁边的土壤。2.检测菌株血清型和六种毒力基因（aggR、elt、eae、ipaH、stx、est），除未定型的菌株外，分离菌株的优势血清型是O125:H5、O1:H2和O125:H18，所有菌株不携带所测的毒力基因。3.对大肠杆菌的药敏检测发现，所有菌株对加替沙星、卡那霉素、阿米卡星和阿莫西林/克拉维酸高度敏感。另外耐药率最高的是甲氧苄啶/磺胺甲恶唑，其次是链霉素、四环素、氨苄西林，对其他抗生素7种抗生素存在一定程度的耐药，但耐药率不高。4.所有大肠杆菌进行PFGE分型，使用85%的相似度同源分析共得到13个基因簇和一些分散的基因型，两个主要基因簇分别包含14株和5株细菌。