混合、同轴与乳液静电纺丝方法制备活性组织工程支架

被引量 : 16次 | 上传用户:wxhex2008
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
组织工程学是一门将细胞生物学和材料学相结合的新兴学科。组织工程学通过将种子细胞种植于仿生支架材料上,并在体外培养增殖,在形成新的组织后植入受损部位,从而达到修复和重建原人体组织结构和功能的目的。因此,组织工程学的关键,同时也是具有挑战性的一步就是如何制备具有仿生天然细胞外基质的工程支架。首先,这种组织工程支架要在结构上模拟天然细胞外基质的三维多孔结构;其次,该支架要具有良好的生物安全性和相容性;最后,这种支架要从功能上模拟天然细胞外基质,即能够促进细胞的生长和诱导组织的形成。本论文采用静电纺丝方法制备了从材料、结构和功能上仿生天然细胞外基质的纳米纤维组织工程支架。首先,通过混合静电纺丝的方法制备了聚乳酸-已内酯(PLLACL)/壳聚糖的复合纳米纤维膜,系统地研究了该复合纳米纤维的各项性能,包括表面形态、结晶结构、化学结构、力学性能、热力学性能、亲水性和生物安全性。结果表明,当PLLACL占较大比例时,纤维膜的力学性能较好,而亲水性和生物相容性则较差,而且,复合纤维保持了两种物质的化学结构和结晶结构。在对聚已内酯-叶绿素铜钠盐的研究中,分析了叶绿素铜钠盐的质量比对纳米纤维最终形态的影响,当叶绿素铜钠盐质量为聚已内酯的20%时,制备的物质已经失去了原有纳米纤维的形态;并且.,叶绿素铜钠盐的加入也对纤维膜的力学性能有着消极的影响;降解实验和释放实验证明在纤维膜浸入模拟人体环境的溶液中10小时内,叶绿素铜钠盐几乎全部释出,也就为新组织和再生细胞的生长提供了充足的空问。采用同轴静电纺丝方法制备负载生物活性因子的功能纳米纤维。将PLLACL溶解于三氟乙醇(TFE)作为同轴静电纺丝的外层溶液,用于形成纳米纤维的壳层;将蛋白质溶解于超纯水中作为内层溶液,并用于形成纤维的芯层。同轴静电纺丝纳米纤维相对于单纺的PLLACL纤维具有较细的直径,并且由于蛋白质的加入和纤维结构的变化,其力学性较差;但是其亲水性基本上没有变化。为更好的研究蛋白质由同轴静电纺丝纳米纤维中释放的行为,本文采用盐酸四环素为模型药物制备了“混纺”和“同轴”两种纳米纤维膜,并使它们在相同的条件下进行释放实验。结果证明,盐酸四环素由混纺纤维中释放时产生了严重的突释现象,而它由同轴纺丝纤维膜中释放时则表现出相对稳定和持续的行为。我们从理论上解释并模拟了蛋白质在纤维中的浓度变化;并且制备了多种不同形状的神经导管支架,特别是螺旋外形的导管支架在抗压和卷曲性能方面非常突出。由于大鼠肾上腺嗜铬神经瘤细胞(PC12)能够在神经生长因子(NGF)的作用下出现形态上的分化,即生长出特有的神经轴突;因此,本文中选用PC12细胞来验证从同轴静电纺丝纳米纤维中释放的NGF的活性。结果证明由同轴静电纺丝纳米纤维膜中释放的NGF具有神经诱导活性。采用乳液静电纺丝的方法制备具有神经诱导活性的功能纳米纤维。该种静电纺丝乳液包括PLLACL溶解于三氯甲烷形成的油相溶液、蛋白质溶解于超纯水形成的水相溶液和作为稳定剂的山梨糖醇酐油酸酯(Span80),,对负载蛋白质的PLLACL纳米纤维表面形态的研究发现,负载蛋白质的纳米纤维具有较小的纤维直径;与单纺纤维膜相比,乳液静电纺丝纤维膜由于乳化剂Span80的加入其力学性能较好;而且由于乳化剂在纤维表面的分布,乳液静电纺丝纳米纤维膜的其亲水性大大改善。本文对乳液静电纺丝纳米纤维的形成过程做了理论上的解释,认为部分纤维是由含有水相溶液滴的乳液拉伸而成,并且在电场力的驱动下乳化剂分子按照亲水基在外、憎水基在内的方式排布在纤维的表面。与同轴静电纺丝相似,蛋白质能够从乳液静电纺丝纳米纤维中以较为稳定的方式持续释放。实验结果表明,从乳液静电纺丝纳米纤维中释放的NGF能够成功的诱导PC12细胞生长出神经轴突,这就证明了通过乳液静电纺丝可以包覆NGF等蛋白质并保持其生物活性。对乳液静电纺丝方法制备负载双组分药物/蛋白质纳米纤维做了尝试性研究。在乳液的油相溶液中混合罗丹明B、水相溶液中混合BSA,分别研究药物和蛋白质的负载和释放情况。实验结果表明,载药后的纳米纤维膜的热稳定性几乎没有改变,而由于药物或蛋白的加入,影响了纤维的结晶性。释放实验表明,位于纤维壳层的药物会以较快的速度释放,且伴有突释现象发生;而包裹于纤维芯层的药物或蛋白则会在长时间内(2周)稳定并持续释放。本文对凝胶静电纺丝聚已内酯做了尝试性研究,并期望对带有珠状或块状物质的静电纺丝纤维做出理论上的解释。通过对凝胶溶液凝胶点的确定和分析,得知在静电纺丝过程中如果出现凝胶的现象则会使纺丝液提前固化,从而在纤维上出现珠状或块状物质。本文采用三种静电纺丝方法(即混合、同轴和乳液电纺丝)制备活性纳米纤维做了系统的研究和比较,并首次提出了负载“双组分药物/蛋白”纳米纤维的概念。本研究为活性纳米纤维组织工程支架的制备提供了参考,并为进一步开展组织工程化人工器官的研究以及临床应用提供了重要的实验数据和科学依据。
其他文献
信用评价机制在C2C在线市场中起到了重要作用,同时也成为了网上拍卖研究中的一个热门研究课题。卖家信用作为对卖家以往行为的一种评价,也从某种程度对商品信息进行了披露。
目的观察辅酶Q10胶囊治疗完心病心绞痛的疗效。方法选择冠心病心绞痛患者126例,随机分为两组,治疗组口服辅酶Q10,观察两组心绞痛发作次数及每次发作的持续时间及心电图变化。
意大利卡斯特尔费达多国际手风琴大赛、德国克林根塔尔国际手风琴大赛和世界杯国际手风琴比赛是当今世界上最著名、最有分量的手风琴赛事。每年来自世界各地的手风琴演奏家汇
基于干旱胁迫普遍存在和多胺可以提高植物抗逆性的认识,本试验选择耐旱性不同的2个番茄品种为研究对象,于2007年4月至2008年10月在西北农林科技大学园艺学院实验模型温室内进
目的观察多囊卵巢综合症(PCOS)无排卵性不孕患者达英-35及二甲双胍预处理后来曲唑诱发排卵的临床效果。方法对2010年1月至2011年4月就诊的PCOS患者,测定基础女性激素,达英-35
随着经济和人民生活水平的提高,蔬菜消费量日益增加,以设施蔬菜栽培为主的蔬菜生产在我国北方地区迅速发展。但由于利益的驱使,为获取高产在设施蔬菜生产中长期“大水大肥,不
<正> 在任何语言里和任何语言的发展过程中,都可以或多或少地发现这两种语音现象:异化作用(dis—similation),和换位作用(metathesis)。异化作用和换位作用虽然不及同化作用(
目的分析探讨晚期产后大出血原因、治疗方式及预防措施。方法回顾性分析25例晚期产后大出血患者的临床资料。结果引起晚期产后大出血的主要原因有胎盘胎膜残留,其次为子宫复
<正>许巍,生于西安。16岁的他,开始练习吉他。19岁的他,背着吉他,走进了军营。22岁的他,复员回家,走上职业吉他手的道路,成为西安音乐圈中最出色的吉他手。1994年的他,带着自