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聚乙烯醇(PVA)是一种人工合成的水溶性高分子聚合物,被广泛应用于纺织工业中的上浆剂。经PVA上浆的棉织物,必须经过退浆处理才能增加其吸水性。传统的退浆方法是使用70～90℃的热水对棉织物进行洗脱,洗脱下的PVA随废水排出,这就导致纺织厂排出的废水中含有大量的PVA,而PVA化学好氧量大,可生化性较差,造成水体的严重污染。利用酶法退浆,在退浆的同时进行PVA的降解,提高了退浆废水的可生化性,且从退浆过程的水耗、能耗以及废水的处理费用来看,酶法退浆较传统方法有较大的优势;同时酶的处理条件温和,对棉织物的损害较少,因此PVAase的研究越来越受到重视。本论文在课题组研究的基础上,继续对混合菌发酵产PVAase的发酵条件进行研究,考察了金属离子对混合菌生长和产酶的影响、酵母粉的添加策略对产酶的影响和研究了两阶段营养控制对PVAase发酵的影响。主要研究结果如下:(1)通过金属离子的单因素实验,发现Mg2+和Fe3+对混合菌生长和产酶的影响非常显著,酶活比没有添加前分别提高了449.0 %和1766.3 %;Cu2+和Zn2+对混合菌生长和产酶有明显的抑制作用,酶活比没有添加前分别降低了71.5 %和20.1 %;Mn2+和Ca2+的影响是微弱的。(2) Mn2+和Mg2+的单独添加对混合菌产酶的影响不大,当Mn2+和Mg2+与Ca2+组合添加时,对PVAase生产有促进作用,发酵结束时酶活分别达到1.461 U·ml-1(添加Fe3+、Mg2+和Ca2+)和1.453 U·ml-1 (添加Fe3+、Mn2+和Ca2+),比单独添加Mg2+和Mn2+时酶活分别提高了17.3 %和17.1 %。Fe3+、Ca2+与Mg2+、Mn2+的组合添加,一方面增加了酶的表观活性,另一方面,能有效地促进PVAase的生物合成,提高发酵液的总酶活。(3)通过不同初始PVA浓度下混合菌分批发酵生产PVAase的发酵曲线分析得出酵母粉是最有可能的限制性因素。分析比较了一次性补加、分批补加和恒速流加酵母粉对混合菌产PVAase的影响,其中分批补加效果最佳,PVAase酶活达到3.318 U·mL-1。(4)恒速流加葡萄糖和酵母粉可以明显增加混合菌的菌浓,在流速为2.4 g·L-1·h-1时,DCW达到27.18 g·L-1。初始PVA浓度为1 g·L-1,葡萄糖和酵母粉流加结束后添加4 g·L-1的PVA,经发酵PVAase酶活达到8.020 U·mL-1,是初始酶活1.289 U·mL-1的6.22倍,达到了提高菌体浓度和PVAase酶活的目的。