aGVHD患者血清对ADSCs调节T淋巴细胞免疫功能影响的研究

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目的:研究aGVHD患者血清刺激ADSCs后其免疫调节功能的改变,揭示是否可通过aGVHD患者血清刺激ADSCs增强其抑制aGVHD的作用。方法:分离、培养、纯化ADSCs,进行流式细胞表面标志物鉴定;aGVHD患者血清刺激24h后,流式细胞术鉴定HLA-DR表达变化;高倍镜、扫描电镜下观察ADSCs形态学变化。分离、纯化PBMC,P3 ADSCs与PBMC按1:10比例共培养5天。(1)A组:血清刺激ADSCs24小时后,ADSCs+PBMC;(2)B组:PBMC;(3)C组:ADSCs+PBMC。5天后流式细胞术鉴定各组PBMC中Th1、Th2、Th17、Treg亚群变化;使用ELISA检测各组上清液中IFN-γ、IL-4、IL-10因子变化。结果:(1)aGVHD患者血清刺激ADSCs后,其细胞周长、最长直径均较前减小,P值均<0.05,差异有统计学意义;(2)aGVHD患者血清刺激ADSCs后,其表面HLA-DR表达同前无显著变化。(3)aGVHD患者血清刺激ADSCs后,其下调Th1亚群分布、抑制IFN-γ分泌的能力显著增强,P值均<0.05,差异有统计学意义。结论:aGVHD患者血清加入培养基刺激ADSCs后,其抑制aGVHD的能力显著增强,同时ADSCs仍维持低免疫原性,表明aGVHD患者的血清可能是作为体外增强ADSCs对aGVHD免疫抑制作用的有效、安全的手段。
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