磁场对培养的人脐静脉内皮细胞的增殖活性及一氧化氮合酶表达的影响

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一.背景和目的 经皮冠状动脉腔内成形术(PTCA)已成为冠心病血管重建治疗的重要手段。冠状动脉内支架又为PTCA的成功和疗效提供了可靠的保障,并有效的降低了PTCA术后RS的发生率。但支架仅是依赖其支撑作用改变了病变血管的收缩性塑形,并不能抑制血管损伤后的内膜增生。RS率仍有10—15%,严重影响了该技术的远期疗效。有关RS防治研究的文献较多,但所提出的防治措施的疗效均未达到理想的水平,因此探讨新的防治措施势在必行。近年来研究表明内皮细胞(EC)与RS的发生发展密切相关,血管损伤后EC再生修复的速度对RS的程度起着关键作用,加速EC的增殖修复可能是防治RS的有效措施。同时,PTCA及支架术后新生EC发生的EC功能不全,一氧化氮合酶(NOS)表达降低也被认为是导致RS的重要因素。 研究表明,磁场具有广泛的生物学效应,可影响培养的细胞基因的转录和翻译,改变细胞跨膜信号的转导。对于损伤性病变,磁场具有促进细胞增殖与分化,有利于组织修复的作用。经磁场作用的酶,大都有增强活性的倾向。本研究目的旨在观察低频电磁场(LFEMF)和恒磁场(SMF)对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)增殖活性和NOS表达的影响,为LFEMF和SMF用于RS的防治提供一定的理论依据。 二.方法 第四军医大学硕十学位论文 *)人脐静脉内皮细胞系ECVl04体外培养并传代,分别给予不同的 LFEMF和SMF作用。口广h-胸腺啼陡脱氧核昔一H丁dR)掺入法分析LFEMF 和SMF对HUVEC的DNA合成的影响。刀流式细胞术分析LFEMF和SMF 对HUVEC细胞周期的影响/闪ABC免疫酶染色法并采用德国Leica Q500MC 图像分析系统分析LFEMF和SMF对HUVEC的NOS表达的影响。 三.结果 口)LFEMF对HUVEC增殖活性的影响:勺1dR掺入法结果显示,除 20 mT 30 min组,40 mT 20 min组外,其他各 LFEMF作用组的Cpm值与对 照组均有显著差异(P、0刀引。各LFEMF作用组对HUVEC的增殖活性随作 用时间延长呈现先促进后抑制的趋势。流式细胞技术结果显示LFEMF促使 GI期细胞活跃而向S期转变,LFEMF作用组S%显著高于对照组:GI%较 对照组降低,增佰指数阶值(S+G。M)%增高,表现为促进HUVEC增殖的 作用。但随作用时问延长,促进作用减弱变为抑制作用T刃刀5人p)LF*M F 对 HUVEC的 NOS表达的影响:除 60mT 20min组,60ruT 30min组外,其余 uE*F作用组内皮细胞结构型*0引ec*OS)表达均较对照组增强J<0刀引, 各 LFEMF作用组与对照组诱生型 NOS厂NOS)均无表达。o3)SMF对 HUVEC 增殖活性及NOS表达的影响:SMF组CpC值与对照组相比显著增高(P<0刀引。 S*F组S%显著高于对照组;o%较对照组降低,k1值增高,差异显著 (P<0刀引。SNIF组CCNOS表达较对照组显著增强(P<0刀1)。SMF组与对照 组iNOS均无表达。 四.结论 (l)适当磁场强度和作用时间的 LFEMF具有促进培养的 HUVEC增殖 活性的作用。 (二)适当磁场强度和作用时间的 LFEMF对培养的 HUVEC的 NOS的表 达具有选择性作用,显著增强了HUVEC的ecNOS的表达,但并不增强iNOS 的表达。 ()适当磁场强度和作用时间的 SMF具有促进培养的 HUVEC增殖活性 -3- 第四军医大学硕十学位论文 的作用。 (4)适当磁场强度和作用时间的SMF对培养的HUVEC的NOS的表达 具有选择性作用,显著增强了HUVEC的ecNOS的表达,但并不增强iNOS 的表达。 (5)适当的磁场对PTCA及支架植入术后的RS可能具有防治作用。
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