具有时序性的血管损伤修复功能的透明质酸纳米颗粒复合薄膜的制备和生物学评价

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血管支架植入是治疗冠状动脉疾病的主要方法。对动脉血管支架进行表面修饰以抑制凝血和再狭窄已经成为了一个新的研究热点。然而,目前的支架表面的生物活性涂层并没有得到足够发展,尚且不能满足动脉血管支架的时序性的生物功能需求。在支架植入后的一个月,受损血管组织周围的病理变化是十分复杂的,并具有时序性。所以,具有早期抗凝血和抗炎症功能,晚期抑制平滑肌增殖并促进内皮细胞粘附的时间依赖性的生物学功能的动脉血管支架可能能满足受损血管修复的需求。在研究中,我们利用相对分子质量为4-kD、100-kD和750-kD的透明质酸(Hyaluronic Acid,HA)和相对分子质量为1.3kD的聚乙烯亚胺(Polyetherimide,PEI)分别制备了三种透明质酸-聚乙烯亚胺颗粒(HA-NPs),通过透明质酸酶溶液浸泡HA-NPs试验,我们发现分子量为100-kD的透明质酸制备的HA-NPs具有良好的稳定性,通过酰胺化反应将100-kD的HA-NPs和100-kD的HA同时接枝于多巴胺/己二胺修饰的316L不锈钢表面,由此得到HA-NPs与HA共同修饰的复合表面(HA-NCFs),HA-NCFs在磷酸盐缓冲液中浸泡20天,通过光学显微镜的暗场光镜观察HA-NCFs在浸泡0,1,3,5,10,20天后的表面颗粒释放情况,我们发现HA-NPs逐渐从表面脱落。体外实验研究包括抗凝血、抗炎、抗菌、内皮细胞和平滑肌细胞种植试验,体外结果试验说明新制备的HA-NCFs抑制了纤维蛋白原、血小板、巨噬细胞、内皮细胞、平滑肌细胞的粘附。但是随着HA-NPs从表面脱落,HA-NCFs渐渐表现除了优异的综合的生物相容性:促进内皮细胞的粘附和增殖的同时,抑制血小板、巨噬细胞和平滑肌细胞的粘附及平滑肌细胞的增殖。最后,通过斯普拉-道来氏大鼠的腹主动脉植丝试验结果进一步验证了HA-NCFs具有抗炎、抑制平滑肌增生和促进内皮化的功能。需要特别指出的是,具有时序性生物功能的HA-NCFs表现出了比只有HA修饰的表面(无时序性功能改变)更好的抑制再狭窄效果。该研究为构建全新的具有时序性生物学功能的HA-NPs复合薄膜以满足时序性的生物功能需求提供了重要的基础。
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