天然红色茶叶的化学分析

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本文以新品种茶叶-紫娟茶为研究对象,针对紫娟茶中黄酮类化合物的组成及其生理活性展开研究。通过甲醇(含0.1%TFA)浸提,乙醚、氯仿萃取和Amberlite XAD-7HP树脂层析及乙酸乙酯分离得到紫娟茶中ZTE1, ZTE2, ZTE3三种提取物。ZTE1和ZTE2中花青素含量(以矢车菊-3-O-β-葡萄糖苷为标准品)为5.1±-0.1和17.1±0.4mg/g, ZTE3无花青素检出;ZTE1,ZTE2,ZTE3中总酚的含量(以邻苯二酚为标准品)为1.65±±0.27,0.74±0.21,0.98±0.29mg/mg。针对三种紫娟茶提取物分别进行了清除DPPH自由基、ABTS自由基能力、还原铁离子以及抑制脂质过氧化能力的评价。结果表明三种提取物清除DPPH自由基的能力高于维生素E和BHT, IC50分别为10.86,15.53,8.77μg/mL;清除ABTS自由基的能力高于维生素E和BHT, IC50分别为4.61,5.48,3.58μg/mL;三种提取物还原铁离子的能力高于BHT,其中ZTE1高于维生素C和BHA;抑制亚油酸过氧化的能力高于维生素C和Trolox。同时对三种紫娟茶提取物的美白活性进行了评价。利用单因素和正交实验确定了酪氨酸酶单酚酶和二酚酶的最适反应条件,针对单酚酶为:L-酪氨酸浓度为10.0mmol/L,酪氨酸酶浓度为0.30g/mL,反应时间为15min,反应温度为30℃;针对二酚酶为:邻苯二酚浓度为7.5mmol/L,酪氨酸酶浓度为0.035g/mL,反应时间为15min,反应温度为15℃;ZTE1对酪氨酸酶单酚酶和二酚酶活性的抑制作用最强,其次是ZTE2。ZTE1,ZTE2,ZTE3对酪氨酸单酚酶和二酚酶的ICso分别为6.85×10-4,8.21×10-4,16.29×10-4g/mL和6.37×10-4,7.62×10-4,13.53×10-4g/mL利用Silica gel60C18色谱柱对ZTE2中的花青素进行了提取纯化,得到AN-1,AN-2,AN-3,AN-4四种花青素组分。通过LC-MS,标准品比对,NMR图谱和HR-TOF-MS等分析方法确定AN-1,AN-2,AN-3和AN-4分别为飞燕草-3-O-β-半乳糖苷,矢车菊-3-O-β-半乳糖苷,飞燕草-3-O-β-D-(6-(E)-对香豆酸)吡喃半乳糖苷和矢车菊-3-O-β-D-(6-(E)-对香豆酸)吡喃半乳糖苷。这四种化合物均为第一次在紫娟茶中报道。对仅在茶叶中检出的AN-3和AN-4的抗氧化活性进行了评价。结果显示,AN-3和AN-4清除DPPH自由基的能力高于和BHT, IC50分别为26.38和29.79μg/mL;AN-3和AN-4对铁离子还原能力也高于维生素E和BHT。我们对紫娟茶叶中化学成分的解明及其生理活性的探讨将为紫娟茶的开发利用提供科学依据。
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