唾液斑痕中四种常见抗高血压药物的超高效液相色谱串联质谱法检验研究

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为了充分利用犯罪现场中的体液斑痕来甄别犯罪嫌疑人身份属性和个体身份特征,在侦查初期确定侦查方向,缩小侦查范围,本文针对体液斑痕从理化分析的角度进行深入挖掘。本文选取犯罪现场常见的体液斑痕——唾液斑痕,建立一种对唾液斑痕中抗高血压药物的高效、准确的提取检测方法,旨在为刻画唾液斑痕供体的特征(是否患有高血压)提供科学依据。本文选取市场常见的四种有代表性药物的抗高血压药物——缬沙坦、尼莫地平、阿罗洛尔和吲达帕胺进行研究。本文实验研究如下:1.建立了缬沙坦、尼莫地平、阿罗洛尔和吲达帕胺的色谱及质谱检测方法;2.建立了渗透性客体和非渗透性客体上唾液斑痕的提取净化方法;3.研究了唾液斑痕遗留客体、遗留时间、保存温度以及DNA检测对目标物检测的影响;4.将方法应用于实际检材中,验证了所建立方法的有效性和可行性。研究的主要结果如下:1.色谱柱为Waters ACQUITY~?HSS C18(50mm×2.1mm,1.8μm);流动相有机相为乙腈,水相为0.1%甲酸水溶液;采用梯度洗脱程序;电喷雾离子化源正离子模式(ESI+);多反应监测(MRM)扫描模式;缬沙坦定性离子对436.26>207.15,定量离子对为436.26>235.14;尼莫地平定性离子对419.21>301.10,定量离子对为419.21>345.15;阿罗洛尔定性离子对为372.11>298.95,定量离子对为372.11>316.03;吲达帕胺定性离子对366.03>91.00,定量离子对为366.03>132.07。缬沙坦、尼莫地平、阿罗洛尔和吲达帕胺最低检测限分别为0.02ng/mL、0.02ng/mL、0.01ng/mL和0.01ng/mL。该方法在0.1~1000ng/mL范围内线性关系良好,相关系数均在0.99以上。2.在渗透性客体(滤纸)上的唾液斑痕采用剪取法提取,甲醇沉淀蛋白法前处理,四种药物的回收率在83.1~95.1%;在非渗透性客体(载玻片)上的唾液斑痕采用棉签提取法,甲醇沉淀蛋白法提取,四种药物的回收率在83.2~90.1%之间,两种客体上唾液斑痕中目标物的日内精密度和日间精密度均小于10%,方法重现性好,基质效应小,可以应用于实际案件中。3.实验结果表明唾液斑痕遗留客体、保存温度对药物检测无影响,DNA检验后无法检出目标物,遗留时间仅影响尼莫地平的检测。4.实验收集了3名志愿者的烟蒂和水杯进行实际应用检测,证实了方法的有效性。
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