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目的探讨B16恶性黑色素瘤细胞与C57BL/6小鼠骨髓源树突状细胞融合后体外诱导特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)及对B16恶性黑色素瘤细胞的杀伤作用。方法用聚乙二醇(PEG)将B16恶性黑色素瘤细胞与小鼠骨髓源树突状细胞(DC)融合,融合成功后以DC细胞、B16恶性黑色素瘤细胞做为对照组,DC/B16恶性黑色素瘤融合细胞作为实验组,绘制融合细胞生长曲线并进行融合细胞刺激自体T淋巴细胞增殖试验。以DC细胞、B16恶性黑色素瘤细胞、DC+B16恶性黑色素瘤细胞联合培养做为对照组,DC/B16恶性黑色素瘤融合细胞作为实验组,用细胞内细胞素染色法检测DC/B16恶性黑色素瘤融合细胞诱导CTL的活性,体外检测DC/B16恶性黑色素瘤融合细胞融合细胞诱导产生的CTL对B16恶性黑色素瘤的杀伤性作用。实验数据用x±S进行计数,使用SPSS13.0软件,选择one-wayANOVA和LSD’s post hoc test统计学方法对所得数据进行统计学分析。结果小鼠骨髓源树突状细胞(DC)与B16恶性黑色素瘤细胞成功实现融合,给予合适的完全培养基和生长环境后,发现DC/B16恶性黑色素瘤融合细胞的生长情况与DC相类似,其增殖能力与B16恶性黑色素瘤细胞相比明显较弱,细胞培养期间没有实现明显的细胞倍增,说明DC/B16恶性黑色素瘤融合细胞更多了表现出了亲DC的生长增殖特性。以DC细胞、B16恶性黑色素瘤细胞做为对照组,DC/B16恶性黑色素瘤融合细胞作为实验组,观察其对致敏的T细胞的增殖效率。结果显示,DC/B16恶性黑色素瘤融合细胞可有效刺激同源T淋巴细胞增殖,其促进T细胞增殖能力显著高于单纯DC细胞组和B16细胞组,其统计学比较具有显著性差异(p<0.05)。以DC细胞、B16恶性黑色素瘤细胞、DC+B16恶性黑色素瘤细胞联合培养做为对照组,DC/B16恶性黑色素瘤融合细胞作为实验组,采用ELISA法测定了各组的致敏T细胞分泌的IFN-γ后,发现DC/B16恶性黑色素瘤融合细胞的分泌量显著高于几个对照组,组间差异比较具有显著统计学意义(p<0.01)。经过体外杀伤试验后,发现DC/B16恶性黑色素瘤融合细胞融合细胞诱导产生的CTL对B16恶性黑色素瘤具有显著的特异杀伤作用。而B16恶性黑色素瘤细胞单独培养、DC细胞和B16恶性黑色素瘤细胞混合培养对照组则不明显。组间差异具有显著统计学意义(p<0.01)。结论DC/B16恶性黑色素瘤融合细胞能显著促进自体T细胞增殖,能显著促进INF-γ分泌和细胞毒性T细胞的活化,DC/B16恶性黑色素瘤融合细胞融合细胞诱导产生的CTL对B16恶性黑色素瘤具有显著的特异杀伤作用,在抗肿瘤免疫中可发挥重要的作用。