尖叶假龙胆化学成分及含量测定研究

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尖叶假龙胆(Gentianella acuta)为龙胆科(Gentiananceae)假龙胆属(Gentianella Moench.)植物,别名苦龙胆。该属植物全世界约有125种,主要分布在非州和南北温带地区,我国有9种,分布于东北、西北、及西南部地区,其中作为药物使用的有5种。尖叶假龙胆在我国主要用于蒙、藏医学中治疗黄疸型肝炎、头痛、发烧等,而鄂温克族和鄂伦春族的猎民长期用其治疗心律失常等心脏病且效果显著。尖叶假龙胆的现代药学研究很少,其最早的化学成分研究见于2005年,随后又有一些研究报道了尖叶假龙胆的化学成分组成和少数成分的药理作用。尖叶假龙胆中主要含有[口山]酮类、环烯醚萜类、黄酮类、三萜类和甾体类化合物,药理作用主要表现在保肝、降糖、抗氧化、抗炎等方面。民间用药记载尖叶假龙胆具有缓解和治疗心律失常的作用,这一功效在该属其他植物的传统药用功效中并无记载,是该属唯一种具有治疗心脏病作用的植物。论文包括三个部分:1综述概述了我国假龙胆属药用植物的化学成分和药理作用研究进展,该属植物中主要为黄酮、[口山]酮、环烯醚萜、三萜类化合物,另外还含有二倍半萜和甾体类化合物。对于化学成分的研究方法主要是用溶剂浸提法对植物进行提取,再用溶剂萃取分段,硅胶柱色谱结合Sephadex LH-20和Rp-18柱色谱等传统分离手段对其进行化学成分分离,除上述方法外也有利用高速逆流色谱法对该属植物进行化学成分研究的报道。对于该属植物的药理作用研究目前报道的很少,除尖叶假龙胆外只有少数关于新疆假龙胆的现代药理研究。为深入挖掘传统药用植物资源扩大民族药物的应用范围,该属植物的现代药学研究仍需进一步深入。文章还对尖叶假龙胆的植物学、化学成分和一些研究较深入的成分的药理作用进行了概述。和该属其他植物相似,尖叶假龙胆中主要含有环烯醚萜类、[口山]酮类、黄酮类、三萜类等成分,且环烯醚萜类主要是裂环环烯醚萜和其苷类成分,黄酮类成分中黄酮碳苷较多。尖叶假龙胆主要用于保肝利胆和抗炎这与其所含的化学成分有关,其中环烯醚萜类和三萜类成分有抗炎镇静、保肝的作用。与其抗心律失常作用相关的化学成分报道很少,其中只有雏菊叶龙胆酮(bellidifolin)、当药醇苷(Swertianolin)和去甲基雏菊叶龙胆酮(demethylbellidifolin)具有抗心律失常活性,关于该药抗心律失常作用的化学成分和药理作用研究都有待于进一步深入。2尖叶假龙胆化学成分研究利用不同极性的溶剂对尖叶假龙胆药材进行提取,再用大孔树脂进行富集,最后得到5个部分的提取物,石油醚提取物、乙酸乙酯提取物、大孔树脂30%、70%、95%乙醇洗脱部位。利用C8中压柱色谱对尖叶假龙胆大孔树脂70%乙醇洗脱部位进行粗分段结合制备高效液相色谱法进一步分离纯化,最后分离得到化合物20个,结构鉴定了16个,分别为:獐牙菜苷(sweroside)(1),(7S,8R)-dehydrodiconiferyl alcohol9-O-β-D-glucopyranoside (2), decentapicrin C (3), desacetylcentapicrin (4),(7S,8R)-dehydrodiconiferyl alcohol4-O-β-D-glucopyranoside(5),1,5-dihydroxy-3-methoxyxanthone8-O-β-D-glucopyranosyl-(1→6)-β-D-glucopyranoside (7),3-hydroxybenzoic acid methylester (8),1,7-dihydroxyxanthone3-0-β-D-glucopyranoside (10),5-hydroxy-3,4,8-trimethoxyxanthone1-O-β-D-glucopyranoside (Qian2-1),1,5-dihydroxy-3-methoxyxanthone8-0-β-D-glucopyranoside (swertianolin)(F1),1-hydroxy-3,4-dimethoxyxanthone7-O-β-D-glucopyranoside(F2),1,8-dihydroxy-3,4-dimethoxyxanthone5-O-β-D-glucopyranoside(F3),1,8-dihydroxy-3-methoxyxanthone5-O-β-D-xylopyranosyl-(1→6)-β-D-glucopyranoside (4-6),1-hydroxy-3-methoxyxanthone7-O-β-D-glucopyranoside (Xl-2),1,8-dihydroxy-4,5-dimethoxyxanthone3-O-β-D-glucopyranoside (X2),1,8-dihydroxy-3-methoxyxanthone5-O-β-D-glucopyranoside(isoswertianolin)(X3)。其中2和5,3和4,F1和X3,F3和X2为同分异构体,化合物2、3、5、7、8、10. Qian2-1、F3、4-6、X1-2、X3为首次从该属植物中分离得到。3尖叶假龙胆中三个[口山]酮苷的HPLC法含量测定采用HPLC法对尖叶假龙胆中的三个[口山]酮苷1,5-dihydroxy-3-methoxyxanthone8-O-β-D-glucopyranoside,1-hydroxy-3,4-dimethoxyxanthone-7-O-β-D-glucopyranoside,1,8-dihydroxy-3,4-dimethoxyxanthone5-O-β-D-glucopyranoside进行了含量测定,条件为:Thermo syncronis C18(250x4.6mm,5μm)色谱柱,24.5%乙腈-水等度洗脱,流速1.0ml/min,检测波长254nm,柱温35℃。该方法简便、快速、稳定。并测定了不同批次生长发育情况不同的尖叶假龙胆药材中1,5-dihydroxy-3-methoxyxanthone8-O-β-D-glucopyranoside,1-hydroxy-3,4-dimethoxyxanthone-7-0-β-D-glucopyranoside,1,8-dihydroxy-3,4-dimethoxyxanthone5-O-β-D-glucopyranoside的含量,为该药材的种植采收和质量控制提供科学依据。
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