论文部分内容阅读
系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)在亚洲人群的发病率及严重程度高于其他人群,被认为是亚洲疾病(Asia disease),其中狼疮性肾炎(lupus nephritis,LN)为SLE患者最常见的合并症之一,也是SLE主要死亡原因之一。因此,对于LNSLE的研究越来越受到关注与重视。研究表明,Wnt/β-catenin信号和白介素6(IL-6)参与不同类型自身免疫性疾病的发生,证据表明Wnt/β-catenin信号能够通过TLR信号调节细胞的抗感染和炎症反应。而包括IL-6在内的炎性因子是LNSLE病理发生过程的一个关键因子,但目前对于LNSLE发病及进展的分子机制仍然远未阐明,对于Wnt/β-catenin和IL-6信号之间是否存在交互作用并在在LN的致病中发挥作用与机制还未有研究报道。本研究一方面以肾小球系膜细胞系为基础,建立狼疮肾炎模型,体外分析肾小球系膜细胞系在LN-SLE患者血清免疫复合物(immunecomplex,IC)、白介素6(IL-6)和/或抗白介素6抗体(Anti IL-6)作用后Wnt/β-catenin信号的变化,以揭示Wnt/β-catenin信号与IL-6相互作用对LN的发病机制的影响,结果发现外源性LN-SLE患者血清IC能够抑制Wnt/β-catenin信号活性,胞浆中Wnt信号活性抑制基因GSK3β表达上调,而细胞核内Wnt/β-catenin的效应基因β-catenin、转录因子TCF-4以及靶基因CyclinD1表达均下调;相反,外源性给予IL-6作用于人肾小球系膜细胞导致胞浆中Wnt信号抑制基因GSK3β表达下调,而细胞核内Wnt/β-catenin的效应基因β-catenin、转录因子TCF-4以及靶基因CyclinD1和Axin1同样表达均上调。另一方面通过ELISA方法检测111例SLE患者体液(血清、尿液)中Wnt/β-catenin信号Wnt3a配体、FZD8受体以及其抑制因子DKK1等蛋白的含量,统计分析揭示体液中Wnt/β-catenin信号与并发LN的SLE患者(LNSLE)临床的相关性。结果发现,SLE患者组血清和尿液中DKK1水平均高于对照组(p<0.0001),这与血清IC刺激人肾小球系膜细胞能够抑制Wnt/β-catenin信号结果一致,而Wnt3a、FZD8的表达水平没有统计学差异。有趣的是,LNSLE患者组血清和尿液中DKK1、Wnt3a水平同样高于Non-LN SLE(p<0.001),而FZD8水平没有统计学差异。并依据其ROC曲线以及多因素回归分析曲线发现,血清中DKK1曲线下面积为0.783,因此,血清中DKK1可作为鉴别并发狼疮肾炎的SLE患者的诊断生物标志。以上体外研究表明,血清IC刺激肾小球系膜细胞时,通过上调Wnt信号负调控因子Axin1和GSK3β而降低Wnt/β-catenin信号活性,并下调核内靶基因CyclinD1、转录因子TCF-4,从而促进炎症反应发生。血清中DKK1可以作为临床上鉴别诊断LNSLE的血清学标记,因而,本研究揭示在肾小球系膜细胞中Wnt/β-catenin和IL-6信号之间可能形成一个反馈调节来调控体内免疫复合物沉积刺激肾小球细胞炎性的机制,为狼疮肾炎靶向药物的研制以及相关机制的进一步研究提供理论依据。