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研究栽培稻抗旱性对我国稻作可持续发展具有重要意义。本研究的主要目的是把Ac/Ds标签导入早稻297同时鉴定Ds的转座从而建立一个利用Ac/Ds系统构建旱稻突变体库的体系,为以后创建一系列抗旱或敏早突变体进而克隆这些基因打下基础。首先研究了山梨醇对栽培稻愈伤组织的分化作用,之后在本实验室已先期将Ac转座子导入早稻的基础上主要进行了早稻的Ds遗传转化,转基因后代Ac和Ds转化体的鉴定与筛选,Ac与Ds转化体有性杂交及其Ds后代转座初步分析等,得到结果如下:1.两品种粳型早稻297和籼型水稻9311均在愈伤的诱导、继代和分化阶段分别添加不同浓度山梨醇,结果三阶段协调添加山梨醇即10-20-40(g/L)的处理达到最高的愈伤分化率,分别比对照(0-0-0)提高45.1%和32.6%;不管愈伤诱导和继代阶段是否添加山梨醇,分化阶段蔗糖和山梨醇5.5+40(g/L)的配比都可以显著提高愈伤组织分化率,高达82.7%-95.2%,愈伤组织紧实,鲜黄,比其他处理有更多的绿芽点,同时9311愈伤组织褐化得到有效的抑制。2.利用农杆菌介导法把两种Ds载体分别转化到旱稻297中,成功得到24份转基因材料,PCR, Southern杂交和IPCR实验结果证明Ds已经稳定整合到旱稻297中。在遗传转化后的抗性愈伤筛选与分化过程中,对愈伤组织只筛选一次后的分化比筛选两次后的分化,不仅使转化周期缩短一个月,且转化效率也明显提高。3.采用抗生素筛选种子的方法对126份早稻297的Ac转基因材料T2代种子做抗性筛选,经T3,T4,T5逐代筛选得到64份纯合材料和23份非纯合材料,共87个转化事件(94个株系)。16份转Ds材料用同样的方法从T1筛选至T3代,13份达到纯合。4.对Ac与Ds转化体有性杂交后代12个组合1289株F2的Ds两侧特异序列的PCR扩增及其转座与非转座差异分析,证明Ac/Ds杂合体后代发生了Ds转座,转座率为29.6%。进一步分析发现,单拷贝Ds组合的Ac/Ds杂合体后代易发生Ds转座,转座率超过50%,且较多为性细胞转座,有进一步研究与利用价值,而双拷贝Ds组合的后代不易转座,且多为体细胞转座,利用价值不大。此外,还发现单拷贝Ds的Ac/DsF2代所有Ds转座的植株中90%以上含Ac。田间涂抹Basta和抗生素筛选实验表明,Ac/Ds杂交F2代的Basta、潮霉素和G418的抗性植株中的Ac或Ds阳性率都很高,单拷贝的Ds杂交组合的Ds鉴定,潮霉素与PCR筛选的一致性大于81%,而对双拷贝的Ds杂交组合此两者筛选Ds的一致性很低,推测可能发生了抗潮霉素基因沉默,而含有Ac的杂交后代中,多数发生了抗G418基因沉默。5.对94份T3-T5代转Ac株系和22份T3代转Ds株系做农艺性状变异分析,发现转基因株系间多数农艺性状围绕对照早稻297均值发生了较大幅度的正反向变异;农艺性状之间也存在复杂的相关性;在Ac株系前6个主成份中,株高、结实率和穗粒数等因子作用最大,并主要依据它们的信息将后代株系划分为6个类型,第四和第一类型中株系表现较为优秀;Ds株系可以划分为4个类型,第三和第四类型中株系表现较为优秀。这一结果可为转基因水旱稻育种研究的种质创新理论与实践提供借鉴。旱稻Ac/Ds标签的导入与转座引起的抗旱相关性状的改变及其关联性有待下一步深入研究,其突变体库有待进一步构建与完善。