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解吉那保()为常用藏药之一,在传统藏医药学中,用于治疗热性赤巴病等。其基源植物涉及龙胆科龙胆属秦艽组5种开蓝紫色花的植物:粗茎秦艽Gentiana crassicaulis Duthie ex Burk.、小秦艽G.dahurica Fisch.、管花秦艽G.siphonantha Maxim.Ex Kusnez.、全萼秦艽G.lhassica Burk.和长梗秦艽G.waltonii Burk.。
粗茎秦艽、小秦艽及管花秦艽已有系统的生药学研究工作,而目前尚未见对全萼秦艽和长梗秦艽这两种基源植物系统、深入的研究。为此,我们在品种与资源考察的基础上,开展了全萼秦艽和长梗秦艽生药学研究以及药材初步的品质评价;并进行了藏药解吉那保的DNA分子鉴定工作。具体研究内容与结果如下:
一、生药学研究
1.原植物考察
通过野外考察、收集标本与分类学鉴定,掌握了全萼秦艽和长梗秦艽的形态学特点及分布区。
2.药材形态特征
在藏药中,全萼秦艽和长梗秦艽的地上部分和地下部分皆可入药,地上部分较易鉴别,地下部分即根的外形相似,因此鉴别的意义有限。
3.组织学特征
从两个方面去考察全萼秦艽和长梗秦艽的组织学特征:横切面,粉末。
根的横切面特征中,两种秦艽大于1mm的根均容易形成裂分。全萼秦艽次生构造中形成层不明显,可作为该种的鉴别特征。长梗秦艽的次生构造中可观察到形成层的层数多,且异常形成层明显,直径较大的导管与直径较小的导管切向相间排列为该种的鉴别特征。
两者粉末都含有木栓细胞、导管和纤维,粉末特征对于这两个种的鉴别意义有限。
4.理化鉴定
运用薄层鉴别的方法,将全萼秦艽、长梗秦艽与粗茎秦艽作比较,结果显示,氯仿部位和正丁醇部位均能够找到鉴别三种秦艽的荧光斑点。不仅斑点位置不一致,而且颜色也不同,溥层色谱有较好的鉴别意义。
二、品质评价
我们参照中华人民共和国药典(2010版)秦艽项下品质评价的方法,并结合考虑藏药解吉那保的用药习惯,分别测定了全萼秦艽和长梗秦艽药材的地上部分(茎叶和花)和地下部分(根)的龙胆苦苷含量。定量分析结果初步显示全萼秦艽和长梗秦艽的茎叶和花中龙胆苦苷的含量高于根中的含量,提示其地上部位的质量可能优于地下部分,此结果与传统藏药解吉那保的用药习惯是一致的。
因此,在研究传统民族药的工作中,首先要充分了解民族药的用药习惯。
三、分子鉴定研究
测定了全萼秦艽、长梗秦艽和粗茎秦艽的rDNA ITS区序列,并参考GenBank相关资料,评价了该片段的系统学意义。结果显示,rDNA ITS区序列对解吉那保各品种具有很好的种间分辨率,在该类品种的分子鉴定中具有较高价值。另外,从贮存半年以上的药材中提取了可供rDNA ITS区序列扩增使用的总DNA,并获得目的片段,可为深入的解吉那保药材DNA分子鉴定提供参考。