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目的：建立再生肝中各种细胞的分离鉴定方法；在组织和细胞水平上，研究大鼠肝再生过程中VEGF和HSP70的表达变化，并探讨VEGF和HSP70在肝再生过程中的作用。方法：300只大鼠随机分为正常对照组、假手术组和实验组。切除实验组大鼠2/3肝，分别于术后恢复2h、4h、8h、12h、16h、24h、36h、48h、72h、96h、120h、144h取肝组织或原位灌注分离细胞。用免疫组织化学和Western-blot技术检测肝组织和分离的肝实质细胞中VEGF和HSP70的表达变化，并做图像分析。结果：(1)本实验总结出一套简单易行的肝脏中肝实质细胞、Kupffer细胞、肝血窦内皮细胞、肝星状细胞的分离鉴定方法。(2)免疫组化结果显示，VEGF主要由肝实质细胞分泌；在正常肝脏中很少表达，大部分肝切除后24h肝内VEGF表达开始增加，72h达到高峰，144h后恢复正常(P＜0.01)。肝组织Western-blot检测结果表明，大鼠肝部分切除后24hVEGF的表达量开始增加，48h-72hVEGF的表达量达到高峰，然后逐渐下降恢复到正常水平；所分离的肝实质细胞匀浆液中VEGF的表达量与肝组织匀浆液相比有一定的减少，尤其是PH36h到96h。(3)Western-blot结果与正常对照组相比，再生肝组织内PCNA的表达量分别在16h、36h、96h出现三个表达高峰，120h后开始下降，至144h后基本恢复到正常水平；分离恢复不同时期的肝实质细胞与肝组织表达规律基本相同。免疫组化结果显示肝大部分切除后，在36h到48h之间有很大一部分肝实质细胞表现为PCNA阳性，72h时肝血窦内皮细胞开始呈现PCNA阳性。(4)Western-blot检测结果表明正常肝组织中HSP70低水平表达，PH后2h内HSP70的表达量有明显的上升，12-24h表达水平较高，在96h表达量最多，以后又逐渐恢复到正常水平；而分离的不同恢复时期的肝实质细胞匀浆液中PH2h、48h、96hHSP70分别出现表达高峰，接着慢慢回落。结论：本实验总结的细胞分离和鉴定方法具有简单易行、成本低廉的特点，这为进一步研究肝再生奠定基础。VEGF与表达在肝血窦内皮细胞上的VEGF受体特异结合来参与肝血窦的再生，促进肝脏结构的重建。肝再生过程中所需要的VEGF不仅由肝实质细胞分泌，而且有其它来源。肝实质细胞表达的HSP70在肝再生过程中参与细胞周期调控及蛋白质的合成、降解及转运等生物学过程，具有非常重要的作用。