脑胶质瘤具有高复发率、生存率低的特点,是最具有侵袭性的恶性肿瘤之一。多种免疫细胞浸润脑胶质瘤组织中,形成高度免疫抑制的肿瘤微环境,促进脑胶质瘤的发展与转移。免疫细胞与脑胶质瘤之间的相互作用机制尚未完全阐明,是临床上脑胶质瘤的免疫疗法仍未取得实质性进展的重要原因之一。了解脑胶质瘤中募集的免疫细胞类型及其空间分布,将有助于深入理解免疫细胞与肿瘤细胞之间的相互作用,有利于建立脑胶质瘤的免疫治疗新方案。本研究构建了一株稳定表达大斯托克斯位移黄色荧光蛋白m Ametrine的脑胶质瘤（m Ametrine-GL261）细胞株,并将其应用于脑胶质瘤中免疫细胞类型及空间分布的多色光学成像研究。本研究主要研究结果如下:（1）确定m Ametrine-GL261细胞株的发光率与成瘤性。通过PB转座系统将m Ametrine的基因序列随机插入到GL261细胞基因组中,获得稳定表达黄色荧光蛋白的GL261细胞株。共聚焦成像与流式细胞术验证了m Ametrine-GL261具有高发光率（95%以上）。将m Ametrine-GL261细胞种植在小鼠脑部纹状体区域以制备脑胶质瘤模型,使用Evans Blue染色与HE染色验证了m Ametrine-GL261的成瘤性。（2）共聚焦成像研究脑胶质瘤中神经元的分布。成像结果表明,随着肿瘤的生长,仅有少量的神经元保留在肿瘤内部,约为正常脑区神经元数量的8%左右。荧光成像显示m Ametrine-GL261细胞株具有极强的浸润性和转移性:在肿瘤周围可以观察到单个肿瘤细胞浸润生长的现象;在肿瘤细胞注射部位之外甚至在对侧半脑中,可观察到转移灶的形成。（3）光学成像探究脑胶质瘤中免疫细胞的类型与分布。多色荧光成像结果表明,原位脑胶质瘤中单核-巨噬细胞和T细胞主要分布在肿瘤内部,细胞数量分别是肿瘤周围浸润的单核-巨噬细胞和T细胞数量的6倍和1.8倍。单核-巨噬细胞和T细胞在肿瘤转移灶大量募集,分别是原位脑胶质瘤内部单核-巨噬细胞和T细胞数量的1.7倍和1.5倍;而小胶质细胞在肿瘤内部和肿瘤周围的数量没有显著性差异。通过标记血管,发现m Ametrine-GL261细胞株具有沿血管壁外围进行迁移的典型特征。（4）初步探索姜黄素纳米颗粒对脑胶质瘤的治疗疗效。通过连续、多次的尾静脉注射给药对脑胶质瘤荷瘤小鼠进行治疗。使用Evans Blue对姜黄素纳米颗粒治疗组和PBS对照组的荷瘤鼠肿瘤进行染色,定量分析两组肿瘤的面积。结果显示,与PBS对照组相比,姜黄素纳米颗粒治疗的荷瘤鼠颅内肿瘤面积更小。综上所述,本研究通过多色光学成像展示了单核-巨噬细胞、T细胞和小胶质细胞在脑胶质瘤及其转移灶中分布的空间异质性:脑胶质瘤及其转移灶中大量浸润单核-巨噬细胞和T细胞;相比原位脑胶质瘤,转移灶内部聚集的单核-巨噬细胞和T细胞的密度更高;小胶质细胞的数量在肿瘤内部、肿瘤周围及正常脑组织之间均没有显著性差异。由此,本研究揭示的脑胶质瘤及其转移灶的免疫细胞类型与空间分布差异性,将为脑胶质瘤的靶向免疫调控和免疫治疗方案设计提供重要的实验依据。