百日草优良自交系离体保存和种子超低温贮藏

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百日草(Zinnia elegans)为一年生草花,许多栽培品种都是由墨西哥的野生种培育而来,经过选育出的优良品种多采用种子保存,种子随保存时间的延长,活力会不断下降,这就要求不断的田间播种以更新种子活力。通过组织培养保存和超低温保存可以较好的克服这个缺点。本试验以课题组培育的3个优良自交系S5、J9、J10为材料,通过组织培养和超低温方法保存无菌苗和种子材料,探讨了百日草组织培养保存体系及适合种子超低温贮藏的方法,以期为百日草优良自交系保存提供理论和实践依据。本试验得出的结论如下:(1)组织培养保存:采用百日草成熟种子进行以苗繁苗的无菌培养,消毒过程采用二次消毒法。首次消毒先用70%的酒精处理1min,之后用0.6%NaOCl消毒20min,剥去果皮后进行第二次消毒,用0.6%NaOCl消毒5min,接种在MS培养基上,发芽率可达80.0%。无菌发芽最适合的培养基为MS,蔗糖含量为30 g/L,14h/10h的光照培养条件。百日草在不加任何激素的MS培养基上就可以增殖2.5倍,虽然BA对增殖有较显著的影响,但植株生长状态不佳。生根培养基采用不加任何激素的MS即可,移栽成活率达90%以上。在延缓生长试验中,MS+6mg/LPP333+15g/L Sucrose可以有效的延长继代时间达3个月之久。(2)超低温保存:采用正交设计试验,以自交系S5的种子为试验材料对影响超低温保存效果的主要影响因素(含水量,冰冻保护剂,冷冻和解冻)进行了分析,初步建立了百日草种子超低温保存的方法:通过控制干燥时间,使供试种子的含水量为5.54%,加入10%的二甲基亚砜作为冰冻保护剂,在0℃环境下停留45min,然后直接放入-80℃的超低温冰箱,在流水下解冻。试验证明了冰冻保护剂的重要性,经过最佳方案超低温贮藏的种子发芽率明显高于对照种子,且发芽指数和活力指数与对照无差异。用该方案贮藏J9和J10,同样得到了理想的结果,说明该方法适合百日草种子进行超低温贮藏。
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