【摘 要】
：
目的:基于代谢组学和宏基因组学技术手段,探讨地麦活性糖（ROS+MD,RM）改善Ⅱ型糖尿病的药效及肠道菌群多样性分析研究。方法:（1）以高膳食+STZ诱导SD大鼠Ⅱ型糖尿病为模型,考察RM对大鼠空腹血糖、血清炎症因子、血脂水平等指标的影响,并确定地麦活性糖的最佳比例。（2）确定药物最佳比例后,对量效关系展开实验,同时引入抗生素因素,考察大鼠空腹血糖、腹腔糖耐量实验（Intraperitoneal
【基金项目】
：
上海市科委课题《地麦活性糖制剂治疗糖尿病的新药临床前研究》（1740190200）；
论文部分内容阅读
目的:基于代谢组学和宏基因组学技术手段,探讨地麦活性糖（ROS+MD,RM）改善Ⅱ型糖尿病的药效及肠道菌群多样性分析研究。方法:（1）以高膳食+STZ诱导SD大鼠Ⅱ型糖尿病为模型,考察RM对大鼠空腹血糖、血清炎症因子、血脂水平等指标的影响,并确定地麦活性糖的最佳比例。（2）确定药物最佳比例后,对量效关系展开实验,同时引入抗生素因素,考察大鼠空腹血糖、腹腔糖耐量实验（Intraperitoneal glucose tolerance test,IPGTT）、胰岛素耐量实验(（Intraperitoneal insulin tolerance test,IPITT）等指标,并取粪便、尿液等样本,待后续研究。（3）肠道菌群多样性主要采用16Sr DNA测序手段,从操作分类单元（operational taxonomic units,OTU）丰度水平、门水平、属水平等开展分析与预测;代谢组学主要研究粪便及尿液样本中的差异代谢产物及对相应的代谢通路展开联动分析;宏基因组学手段主要研究粪便样本中非冗余基因集所注释到各数据库的基因及相应物种功能、组成、通路等,深入研究其起效机理。（4）对地麦活性糖进行药物安全性初步考察,以期为后续的新药开发提供药物安全性基础。结果:（1）在RM各比例组中,RM1:1组可较好的降低空腹血糖,对于血清炎症因子、血脂中TG、TC表达水平均具有抑制作用;同时改善胰腺损伤,保护肠道完整性,提高肠道L细胞的GLP-1阳性表达,故确定最佳比例为RM1:1组。（2）再次的药效学实验表明,RM1:1中剂量组及高剂量组降糖效果较好,有效改善大鼠糖耐量及提高胰岛素敏感性;抗生素引入条件下,RM与抗生素的联用降糖效果不明显,提示RM确经肠道起效。（3）肠道菌群多样性结果表明,给予RM治疗后,可提高Bacteroidetes/Firmicutes比例;在属水平上,则存在显著性差异菌属,包括Muribaculaceae、Phascolarctobacterium、Lactobacillus、bacteroides、Ruminococcaceae-UCG-014、Lachnospiraceae、Akkermansia等菌属含量,上述菌属均与短链脂肪酸产生有关;而抗生素组从OTU水平、门水平及属水平等数据分析结果表明,抗生素对肠道菌群破坏性较大,达到了预期实验设计效果。代谢组学研究表明,RM可回调高脂模型组偏离正常组的整体代谢趋势,可通过影响L-棕榈酰肉碱、谷氨酰胺、谷氨酸等氨基酸代谢、能量代谢、脂肪酸降解途径中的关键代谢产物,起到改善Ⅱ型糖尿病作用,从代谢角度阐述RM可能起效机理。宏基因组学结果表明,RM可影响肠道菌群在门水平上丰度,减少Firmicutes的比例,上调Bacteroidetes含量,提高B/F比值,提高proteobacteria含量;推进到种水平层次上研究表明RM给药后显著性影响Lactobacillus＿acidophilus、Phascolarctobacterium＿sp＿CAG＿207、Clostridium＿sp＿CAG＿343等菌种。同时,考察了大鼠样本基因的NOG分布（Non-supervised Orthologous Groups）、Function水平上的各功能丰度以及碳水化合物活性酶的比例及变化趋势;此外,RM可通过影响菌群对宿主的碳水化合物代谢、氨基酸代谢、糖代谢等信号通路途径产生作用。（4）药物安全性考察实验结果表明,在最大剂量给药下,各组KM小鼠体重、进食量、饮水量、随机血糖等并未出现差异;同时,行为学观察表明KM小鼠生理活动正常,无死亡现象;实验终期的解剖研究也表明药物对KM小鼠内脏无明显的损害情况,安全性较高。结论:本文在前期研究基础上,利用分子生物学、16Sr DNA、代谢组学及宏基因组学技术手段,揭示了“RM-肠道菌群-药效”间的联系,阐明RM改善Ⅱ型糖尿病与肠道菌群密切相关,同时影响相关代谢通路及代谢产物而发挥相应药理作用,提示肠道菌群途径可能是RM发挥药效的重点方向之一。
其他文献
目的:通过进行随机对照试验,验证电针治疗膝骨关节炎的有效性,为临床提供循证数据。明确电针缓解KOA疼痛、改善膝关节活动度效果,提高KOA患者的生活和工作质量,延缓KOA的病理发展程度。选用前交叉韧带损伤模型小鼠进行体外实验,探索电针治疗膝骨关节炎的疗效机制。方法:1.电针治疗膝骨关节炎多中心临床研究根据多中心、随机、单盲的原则,纳入300例符合膝骨关节炎标准患者,进行随机分组,分为针刺组和假针组,
目的:复发转移是胃癌术后患者死亡的主要原因。前期研究提示健脾复方胃肠安可通过调控RUN和FYVE结构域蛋白3（RUN and FYVE domain containing 3,RUFY3）的表达来影响胃癌的侵袭转移而发挥抗肿瘤作用。但胃肠安干预后胃癌细胞中RUFY3的表达与抑制胃癌细胞侵袭转移的内在关联性和分子机制仍不明确。本研究旨在明确RUFY3在胃癌中的临床意义及其在胃癌侵袭转移和上皮间质转化
目的:依据大数据挖掘及芯片检测技术,结合临床队列试验、动物体内实验及细胞体外实验,由面到点、逐层递进地探索“风寒湿（Fenghanshi,FHS）”外部因素影响膝骨关节炎（Knee Osteoarthritis,KOA）进展及桂枝汤（Guizhi Tang,GZT）的干预机制研究。方法:1)首先基于FHS队列（2015年2-11月来自上海中医药大学附属曙光医院的KOA患者,n=110）进行气象数据
目的:通过5/6（ablation/infarction,A/I）慢性肾衰大鼠肾内缺氧的角度研究线粒体凋亡途径和P53的活化及肾衰Ⅱ号方的干预作用,探索肾衰Ⅱ号方抑制细胞凋亡和改善肾间质纤维化的作用机制。方法:65只SD雄性大鼠按5/6（A/I）法制备慢性肾衰大鼠模型。30日后,将造模成功的大鼠随机分为三组:模型组、中药组（肾衰Ⅱ号方）和西药组（氯沙坦钾）,每组15只。另取15只大鼠为假手术组。干
目的:采用尿酸性肾病大鼠模型,研究降尿酸方对HIF-1α/VEGF信号通路的影响,探索降尿酸方改善尿酸性肾病大鼠肾脏血管内皮功能保护肾脏的机制。方法:60只SD大鼠,随机分为6组,每组10只,分为:正常组,模型组,别嘌醇组,降尿酸方低剂量组,降尿酸方中剂量组,降尿酸方高剂量组。除正常组,余组采用氧嗪酸钾1500mg/kg/d联合腺嘌呤100mg/kg/d灌胃4周诱导尿酸性肾病模型,造模组灌胃结束后
目的:评价针药结合治疗反复移植失败的临床疗效,探讨中药（温肾活血方）及电针对胚胎着床障碍大鼠子宫内膜蜕膜化的作用机制,为临床治疗RIF提供新的靶点及思路。方法:临床研究:采用完全随机对照研究设计,纳入拟行冻胚移植的肾虚血瘀型RIF患者160例,按入组顺序随机分为中药组、电针组、针药结合组、对照组。各组在常规内膜准备与黄体支持的基础上分别予中药温肾活血方、电针、温肾活血方+电针。治疗1个周期后比较四
目的:健脾辛开苦降法是中医重要治法。本研究探讨健脾辛开苦降法联合化疗治疗晚期胃癌的疗效、安全性及可能的机制。方法:1.采用前瞻、随机对照、双盲的研究方法,选择拟行姑息化疗的晚期胃癌患者70人,随机分为治疗组和对照组,治疗组行姑息化疗联合加味半夏泻心汤颗粒,对照组行姑息化疗联合安慰剂颗粒。持续治疗至疾病进展或无法耐受等出组事件发生。使用K-M生存曲线分析两组中位无进展生存期（Progression-
目的:运用代谢组学技术从“异病同证”角度出发,探索慢性乙型肝炎（CHB）及非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）湿热证的共性物质基础,筛选出湿热证的特征性代谢物。并依据“方证相应”的中医学理论,应用陈建杰教授临床治疗两种疾病湿热证的经验方（清热化湿方）进行干预,观察干预作用下湿热证的治疗调节效应（证候改变）,分析前述获得的湿热证相关代谢物的变化轨迹,进一步明确湿热证特异性代谢物并揭示其主要生物学变化的科
伴随InSAR技术持续发展，其在矿区地质灾害调查领域应用范围与应用效果均有着显著提升。基于此技术，针对大区域连续变形展开跟进监测，有助于对于区域矿区地质灾害进行甄别与勘测。再者搭配高分辨率光学遥感数据，展开孕灾地质环境和矿区地质灾害体初步解译工作，圈定重点变形区和矿区地质灾害隐患类型、范围、变形趋势。为矿区地质灾害风险调查评价提供基础依据。
目的:评价八宝丹治疗肝硬化轻微肝性脑病（Minimal Hepatic Encephalopathy,MHE）的临床疗效,探讨其抗炎作用机制并筛选有效活性成分,希冀为临床治疗MHE供一种新思路。方法:1.八宝丹对MHE患者的治疗作用评价（临床试验）:采用随机对照研究设计,纳入并观察湿热蕴结型肝硬化MHE患者共62例,随机分为乳果糖对照组31例,八宝丹联合乳果糖治疗组31例,两组治疗周期均为8周,检