普萘洛尔对婴幼儿血管瘤裸鼠模型中NF-κB等因子表达影响的研究

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目的:研究核转录因子-kappa B(nuclear transcription factor-kappaB,NF-κB),kappa B抑制因子(inhibitory factor kappa B,IκB)和抗凋亡基因B细胞淋巴瘤因子-2(B-cell Lymphoma-2,Bcl-2)在普萘洛尔干预婴幼儿血管瘤裸鼠模型中的表达情况,探讨NF-κB等因子在普萘洛尔治疗中的可能作用。方法:无菌手术切除4月大的增殖期婴幼儿血管瘤,采用组织块移植法,将新鲜瘤体分成3mm×4mm×5mm大小的组织块,移植于无特定病原体(specific pathogen free,SPF)级裸鼠的双侧后肢皮下,每只两处,建立婴幼儿血管瘤的裸鼠移植模型。在移植后的第45天,将移植瘤组织存活的50只实验裸鼠进行随机分为2组,普萘洛尔干预组(灌注普萘洛尔溶液)和生理盐水对照组(灌注生理盐水)每组25只,进行干预,观察移植瘤的生长变化情况;分别在干预前和干预后第7d、14d、21d、28d,用颈椎脱臼法随机处死两组各5只裸鼠,一次10只,切取血管瘤组织,观察瘤体大小、颜色、质地,用游标卡尺测量瘤体的最大直径a和横径b,根据公式V=π/6×a×b2估算移植瘤体积,分别进行病理切片HE染色、免疫组化检测及组织RT-PCR分析。其中,免疫组化检测移植瘤组织中NF-κBp65、IκB-α、Bcl-2的表达情况;半定量RT-PCR检测NF-κBp65mRNA的表达情况。结果:1.大体标本和HE染色:普萘洛尔组瘤体较干预前逐渐缩小(P<0.05),色泽变淡,质地变硬;HE染色光镜下表现为血管瘤内皮细胞明显减少,并有大量的纤维脂肪组织。生理盐水组瘤体第7d、14d较干预前增大(P<0.05),血供良好,色泽红润,有弹性,HE染色光镜下表现为大量的血管瘤内皮细胞和微细血管;第21d、28d较干预前缩小,色泽变淡,质地变硬,光镜下表现为瘤体细胞减少,伴有大量的纤维组织。在干预后各个时间点上,两组瘤体体积比较具有明显差异(P<0.05)。2.免疫组化:在干预后各个时间点上,普萘洛尔组中NF-κBp65的表达低于生理盐水组,普萘洛尔组中IκB-α的表达高于生理盐水组,普萘洛尔组中Bcl-2的表达低于生理盐水组,差异均有统计学意义(P<0.05);普萘洛尔组中NF-κBp65与Bcl-2两者之间存在直线正相关关系(r=0.901,P<0.01)。3.半定量RT-PCR:在干预后各个时间点上,普萘洛尔组瘤体NF-κBp65mRNA的相对表达低于生理盐水组(P<0.05)。结论:1.普萘洛尔可促进婴幼儿血管瘤裸鼠模型中的瘤体消退。2.普萘洛尔可使裸鼠模型血管瘤组织IκB-α表达升高,NF-κBp65和Bcl-2表达降低。3.普萘洛尔促进裸鼠模型中的血管瘤消退的作用,可能与其降低NF-κB等因子介导的抗细胞凋亡作用有关。
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