白藜芦醇对IL-1β诱导的人髓核细胞分泌炎症介质的影响

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目的观察白藜芦醇(Resveratrol,Res)对IL-1β诱导的人髓核细胞分泌IL-6和IL-8,以及表达MMP-3和TIMP-1的影响,并探讨其可能的作用机制。方法原代分离培养髓核细胞,分为3组:(1)空白对照组(仅给予等体积二甲基亚砜);(2)IL-1β处理组(加入5ng/mL IL-1β作用2h);(3)白藜芦醇组:加入终浓度为5,30,50μmol/L白藜芦醇,与细胞作用0,12,24,36或48h。处理结束后,ELISA检测IL-6和IL-8的产生,real-time PCR检测MMP-3和TIMP-1mRNA的表达。Western blot分析NF-κB p65亚基的转位。结果1.阴性对照组髓核细胞IL-6和IL-8分泌较低。IL-1β作用2h后,IL-6和IL-8产生显著增多。而细胞随后用不同浓度Res处理后,可呈浓度依赖性方式抑制IL-6和IL-8的分泌。此外,5ng/mL IL-1β作用髓核细胞12h即可诱导IL-6和IL-8表达,24h达到高峰。与IL-1β组相比,50μmol/L Res可显著降低IL-6和IL-8水平。2.定量PCR显示对照组中MMP-3和TIMP-1呈一定程度表达。IL-1β处理后,MMP-3显著增高,TIMP-1降低了50%。而经不同浓度白藜芦醇处理后,MMP-3mRNA水平逐渐降低,TIMP-1接近对照组水平。3. Western blot结果显示,IL-1β刺激髓核后,与对照组相比,NF-κB p65亚基核转位水平显著增多。而联合白藜芦醇作用后,细胞核中p65水平随白藜芦醇浓度的增高而降低。结论1.白藜芦醇能抑制IL-1β诱导的人髓核细胞分泌IL-6和IL-8,并降低MMP-3的含量,上调TIMP-1的表达;2.白藜芦醇可能通过抑制NF-κB从而发挥抗炎作用。
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