天然柠檬醛衍生物的抑菌活性与机理研究

来源 :江西农业大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:liongliong441
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植物源杀菌剂是指从具有杀菌、抑菌活性的植物的某些部位提取有效成分,经分离纯化加工而成的用于防治植物病害的药剂。近年来随着人类对杀菌剂的使用不当,环境污染问题不断加重,以及导致很多病原菌产生抗药性,所以开发绿色无污染的植物源杀菌剂势在必行。山苍子是我国重要的经济与生态树种,果实含有油很高,其主成分柠檬醛是重要的香料产品,在开发绿色无污染的植物源杀菌剂具有广阔的应用前景。本文开展了12种天然柠檬醛衍生物对3种常见的木材腐朽真菌、5种植物病原菌及4种食物腐败细菌的抑菌活性与抑菌机理研究,旨在为开发高效、安全和低廉的植物源杀菌剂提供理论依据。为了从12种天然柠檬醛衍生物中开发出绿色高效杀菌剂,采用菌丝生长速率法测定其对3种常见的木材腐朽真菌(绿色木霉菌(Trichoderm aviride)、绵腐卧孔菌(Poria placenta(Fr.)Cooke.)以及彩绒革盖菌(Coriolus versicolor(L.)Qué)),5种植物病原菌(葡萄座腔菌(Botryosphaeria dothidea)、猕猴桃拟盘多毛孢菌(Pestalotiopsis actinidia)、枣拟茎点霉菌(Phomopsis mauritiana)、柑橘炭疽刺盘孢菌(Colletotrichum glecosporioides)、柑橘茎点霉菌(Phoma citricarpa))的抑菌效果。采用SPSS和DPS数据统计系统进行了分析,分别得到了每种化合物的抑制中浓度EC50。采用抑菌圈实验法和琼脂二倍稀释法,测试了12种天然柠檬醛衍生化合物对大肠杆菌(Escherichia coli)、金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、表皮葡萄球菌(Staphylococcus epidermidis)和绿脓杆菌(Pseudomonas areuginosa)的抑菌活性。结果表明:12种天然柠檬醛衍生物对3种木材腐朽真菌均具有一定的抑制作用,并且抑制作用与化合物浓度成正比。依次筛选出对绿色木霉菌抑制作用较强的化合物有四氢香叶醇、橙花醇以及乙酸香叶脂,其抑制中浓度(EC50)依次分别为41.78、108.04、117.02 mg/L;对绵腐卧孔菌和彩绒革盖菌抑制作用较强的化合物均为橙花醇,其抑制中浓度EC50分别为199.19 mg/L和75.49 mg/L。12种天然柠檬醛衍生物对5种植物病原菌也都表现出一定的抑制作用,同样与化合物浓度成正比。依次筛选出对葡萄座腔菌抑制作用较强的化合物为乙酸香叶酯,其EC50为61.06 mg/L;对猕猴桃拟盘多毛孢菌抑制作用最佳的化合物为丙酸香叶酯,其EC50为142.72 mg/L;橙花醇对枣拟茎点霉菌的抑制效果最佳,其EC50为168.88mg/L;对柑橘炭疽病菌的抑制效果最佳的是丁酸香叶酯,其EC50为219.20 mg/L;对柑橘黑斑病菌的抑制效果最佳的是橙花醇,其EC50为323.82 mg/L。对于4种食品腐败细菌12种天然柠檬醛衍生物具有较好的抑菌活性。其中异丁酸香叶酯对大肠杆菌抑菌效果最强,抑菌圈直径为14.83 mm,MIC为8 mg/L;橙花醇对金黄色葡萄球菌及表皮球菌抑制效果最佳,其对金黄色葡萄球菌抑菌圈直径为15.80 mm,MIC为8 mg/L,对表皮球菌的抑菌圈直径为14.33 mm,MIC为16 mg/L;香叶醇对绿脓杆菌抑制效果最佳,抑菌圈直径为15.00 mm,MIC为16 mg/L。对经过筛选出来的化合物抑制生长的木材腐朽真菌及植物病原菌菌体生理生化分析,结果显示化合物对菌种的蛋白质合成有抑制作用,对菌体细胞细胞壁降解酶、过氧化物酶(POD)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活性均有影响,并对丙二醛(MDA)产生具有促进作用,并且随着浓度的增加,作用增强。同时分别利用筛选出来的化合物,对相应的菌体进行处理,结果显示菌体细胞膜的相对渗透率发生变化,表明菌体细胞膜也可能遭受到破坏。
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