【目的】　　原核表达并纯化人癌/睾丸抗原83（CT83），制备CT83单克隆抗体并评价其免疫活性及其在肿瘤光动力疗法中的应用前景。　　【方法】　　于 NCBI 中查找人 CT83 氨基酸序列，分析其抗原表位，采用基因合成技术合成目的基因；采用基因重组技术将目的基因片段克隆至 pET28a 载体，转化 E.coli DH5α；经抗性筛选、酶切及测序鉴定后，将测序正确的重组质粒pET28a-CT83转化E.coli BL21(DE3)。IPTG诱导蛋白质表达，SDS-PAGE对重组蛋白质进行鉴定分析，Ni-NTA亲和层析柱纯化目的蛋白质；将重组的CT83免疫BALB/c小鼠，利用间接ELISA检测小鼠抗血清的效价；采用细胞融合技术将抗血清效价最高的小鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞 SP2/0 进行融合，通过间接ELISA筛选出阳性杂交瘤细胞株，并对阳性杂交瘤细胞株进行亚类鉴定；将阳性杂交瘤细胞株注射于BALB/c小鼠腹腔，收集腹水并经protein A柱纯化后得到大量单克隆抗体；采用免疫印迹技术和免疫组织化学技术分析 CT83 单克隆抗体的特异性；采用间接 ELISA ，流式细胞术以及细胞毒性实验检测7G4-1-Ga结合CT83的能力及对肿瘤细胞的细胞毒性作用。　　【结果】　　成功合成 CT83 基因，并构建原核表达质粒 pET28a-CT83。原核表达质粒pET28a-CT83 转入表达宿主，表达产物经 SDS-PAGE 分析鉴定为目的蛋白质。蛋白质定量电泳最终检测蛋白质浓度为1 mg/mL。获得3株稳定分泌CT83单克隆抗体细胞株（7A10, 7B4, 7G4），7A10细胞株属于IgG2a亚型，7B4和7G4细胞株属于IgG1亚型。免疫印迹和免疫组织化学实验结果表明此单克隆抗体特异性较高。间接 ELISA，流式细胞术以及细胞毒性实验结果表明 7G4-1-Ga 复合物能高特异性地识别CT83，具有较好的肿瘤细胞特异性和细胞毒性。　　【结论】　　成功构建含有人 CT83基因序列的原核表达质粒 pET28a-CT83，获得了高纯度的CT83，成功制备CT83单克隆抗体，并在1-Ga介导的肿瘤光动力疗法中具有一定应用价值。